番茄環斑病毒

番茄環斑病毒

936年,美國東部新澤西發生TomRSV至今已有330個國家和地區發現有該病毒,分別為美國、牙買加、加拿大、巴西、英國(Hollings,Stone & Dale,1972)、墨西哥、日本(Iwalo & Komiro,1974)、瑞典、前南斯拉夫、荷蘭、紐西蘭(Fry & Wood,1978)、智利、前蘇聯、法國、澳大利亞。

(圖)番茄環斑病毒番茄環斑病毒

番茄環斑病毒學名是Tomato ringsopt virus/nepovirus異名是菸草環斑病毒2號 Tomato ringspot virus No.1(Rev.appl.Mycol.15:831),煙病毒13號 Nicotiana virus 13(Rev.appl.Mycol.36:303);Annulus Zonatus(Rev.appl.Mycol.28:514),桃黃芽花葉病毒 Peach yellow bud mosaic virus(Rev.appl.Mycol.24:65),葡萄黃脈病毒 Grape yellow vein virus(Rev.appl.Mycol.35:286),英文名 Tomato ringsopt virus

分類地位

線蟲傳多面體病毒組 R/1:2.8/44+2.4/41:S/S:S/C,Ve/Ne Nepovirus

分布

1936年,美國東部新澤西發生TomRSV至今已有330個國家和地區發現有該病毒,分別為美國、牙買加、加拿大、巴西、英國(Hollings,Stone & Dale,1972)、墨西哥、日本(Iwalo & Komiro,1974)、瑞典、前南斯拉夫、荷蘭、紐西蘭(Fry & Wood,1978)、智利、前蘇聯、法國、澳大利亞、、匈牙利、義大利、中國台灣、土耳其、芬蘭、挪威、波蘭、奧地利、捷克、瑞士、比利時、愛爾蘭、前捷克斯洛伐克等。

寄主植物

(圖)番茄環斑病毒番茄環斑病毒

ToRSV寄主範圍廣,包括雙子葉和單子葉植物的35個科,自然界,ToRSV主要侵染木本植物,草本及觀賞植物。
診斷寄主:
莧色藜(Chenopodium amamaranticolor)昆諾藜:表現褪綠壞死斑,系統頂端壞死(Fig.1);
黃瓜(Cucumis sativirus):局部褪綠壞死,系統褪綠,斑駁。
番茄(Lycopersicon esculentum)局部壞死斑,系統斑駁壞死。
菸草(Nicotiana tabacum):局部壞死斑、壞死環,系統壞死或褪綠環(Fig.2)。褪綠線,病毒侵染後長出的葉片無明顯症狀但含有病毒。
矮牽牛(Petunia hybrida):局部壞死斑,系統新葉壞死乾縮(Fig.3)。
菜豆(Phaseolus vulgaris):局部褪綠,系統皺縮,葉尖壞死。
豇豆(Vigna ungniculata):褪綠或局部壞死,大多分離物引起系統頂尖壞死(Fig.4)。
繁殖寄主:
煙類或木本植物如紅醋栗(redcurrant)適於繁殖病毒,黃瓜、克力夫蘭煙、矮牽牛適於病毒的純化。
試驗寄主;
莧色藜,昆諾藜、菸草、豇豆是有效的枯斑寄主,黃瓜適於作線蟲傳播試驗寄主(Grogan & Lownsbery,1966)。

株系

(圖)番茄環斑病毒番茄環斑病毒

1. 菸草株系:以菸草環斑病毒2號為代表,是典型株系。自然發生在溫室的菸草幼苗,主要分布在美國東部。
2. 桃黃芽花葉株系:自然發生在、扁桃、桃上,分布在美國西部。此株系與Price 的菸草株系較難區分。因為兩株系在草本寄主上的症狀相似,血清學上無區別,而且大多數分離物在桃樹上都產生黃芽花葉症狀(Karle,1960;Cadman & Lister,1961)。
3. 葡萄黃脈株系:自然發生在葡萄上,在草本寄主上引起的症狀與上述兩個株系類似,但可在豇豆上引起頂枯,血清學上也與上述兩個株系不同,主要分布在美國西部(Gooding,1963)。
4. 其它變種:李屬植物上不同分離物(李褐線分離物 Prune brown line,李莖環孔分離物Prunus stem pitting和櫻桃葉斑駁分離物Cherry leaf mottle)存在血清學差異,但差異不明顯。櫻桃葉斑駁分離物不能由Xiphinema californicum傳播(Hoy,Mircetich & Lownsbery,1984)。

檢驗方法 

(圖)番茄環斑病毒番茄環斑病毒

禁止從疫區進口帶病種子,苗木和鱗球莖等無性繁殖材料。如有特殊需要,按規定限量引進,於防蟲溫室肉室隔離種植1~2年,按下列檢驗方法進行檢測。 症狀觀察 將種子、苗木等種植後,觀察各生長階段的症狀。由於種傳苗往往不顯症,所以不能只單憑肉眼觀察,必須作其他室內檢驗。常見病株的症狀如下。葡萄:病株矮化,衰退,葉小而卷,有黃色或褪綠斑駁和環斑,剝開外皮,木質部有凹陷點和條。韌皮部不正常增厚,呈海綿狀,節間短,莖叢簇。座果率低,果料大小不一。蘋果:在主莖的嫁接接口處壞死,壞死處的上部莖腫大,病葉少而小,黃化,叢生。果小而色深;桃:病株的木質部有凹陷點和溝槽,新梢產生黃色芽和花葉;烏飯樹:葉畸形,早落,花萼上有小的壞死斑,果小;蘭花: 葉有褪綠條紋。大花水仙:葉片顯輕花葉;覆片盆子:當年病株不顯症,次年春葉片結果或形成易碎果;大豆、菜豆和豇豆:頂枯、芽枯。 接種鑑別寄主 選擇病毒含量高的部位如幼嫩葉、木本幼苗的形成層和內皮等為接種體,進行汁液接種,接後保持20~25℃防蟲溫度。昆諾阿藜(Chenopodium quinoe):接種後4天,接種葉出現局部褪綠斑,直徑約1mm,後變成壞死斑,並沿葉脈壞死,約1周后,上部未接種幼葉出現系統褪綠斑,後成壞死斑、頂枯、嚴重的整株枯死。番杏(Tetragonia expansa):接種後3~6天,中葉出現局部褪綠斑,直徑約1~1.5mm,後變壞死環斑,繼而擴大並出現壞死環斑。約接後半個月,新長的幼葉出現系統褪綠斑,後擴大成褪綠環斑。再發展為壞死斑,並在莖和葉柄產生褐色條紋,乃至壞死條紋。而南芥菜花葉病毒不產生上述條紋,可與它區別。 血清檢測 瓊脂雙擴散法 適宜檢測顯症的鑑別寄主,如昆諾阿藜和煙番杏,用植檢實驗所製備的血清,檢測病汁的適宜濃度為1/40~1/160。 SPA-ELISA法同上抗血清第1抗體用抗血清的1/2000~1/4000稀釋液,第2抗體用1/1000~1/2000稀釋液,病汁液的適宜工作濃度1/50~1/100; 免疫電鏡 以抗血清的1/1000稀釋液誘捕,1/1000修飾。 綜上所述,檢測TomRSV的步驟如下:先將待測樣品種置於防蟲溫室,觀察症狀→用SPAEUSA檢測全部樣品,可5、10或20樣品一組,分組進行→取陽性組,分單株再測SPA-EUSA,找出陽單株→取陽性株,接種鑑別寄主昆諾阿藜和番杏→鑑別寄主反應陽性者,用瓊脂雙擴散或免疫電鏡檢測。凡以上多種方法鑑定為陽性者,可確定為帶有TomRSV的樣品。 9.有關檢疫規定 番茄環斑病毒為我國公布的《中華人民共和國進境植物檢疫危險性病、蟲、雜草名錄》中規定的一類檢疫性病毒,並且是中俄(中方提出)植檢植保雙邊協定規定的檢疫性病害,應嚴格限制自疫區引進傳毒寄主種苗。經審批許可引進的種苗,應由輸出國出具檢疫症書,進口後在指定的隔離檢疫圃內試種,對傳毒線蟲亦應嚴格檢疫。

危害情況

1975年,ToRSV侵染加拿大安大略的地區葡萄,產量損失76%~95%,甚至造成絕產。同年,ToRSV侵染後,紐約葡萄嚴重減產,奧爾良懸鉤子果實減產21%~50%(Allen& Van Schagen,1982;Stace-Smith,1984;Stouffer, Hickey & Welsh1977;Mircetich & Civerolo,1972)。

病害症狀

(圖)番茄環斑病毒番茄環斑病毒

1.懸鉤子上的症狀:症狀表現不同,包括植株矮化,小果並減產,幼齡植株葉片出現褪綠環斑。第二年,葉片症狀不明顯,但新葉出現偏上性,並且早落。第三年有10%~80%的果枝死亡。通常,顯症被害植株周圍的植株沒有症狀表現。

2.葡萄上的症狀:侵染初期,症狀難以發現,除非嚴重受害而出現冬季死芽,弱株和縮株等症狀。葡萄生長9星期後,一個或多個枝條及其葉片出現明顯症狀,葉子出現黃脈、斑駁、黃化、褪綠、環斑、卷葉、小葉、節間縮短而使整個症狀呈蓮蓙狀叢生,症狀嚴重矮化,座果率降低,果實敗育變小,甚至絕產,幾年內植株漸漸壞死。植株剝皮後,可見增厚的海綿狀韌皮組織及壞死凹陷。病株在田間呈組或隨即分布。

3. 番茄症狀:生長旺盛的枝條出現明顯捲曲和壞死,嫩葉產生褐色壞死環和波紋,壞死葉葉柄及周圍組織經常出現壞死條紋和環斑。若果實較早受侵染,則果實外表產生環斑,顏色由灰色發展到褐色栓皮。

4. 蘋果上的症狀:引起蘋果癒合壞死和退化病。受侵染的蘋果樹,葉變少,葉小,葉色灰白淡綠漸黃化,頂端生長減少且嫩枝呈束狀叢生,果實較小,果皮顏色加深。樹皮顏色淡紅,皮孔突起,側生葉片和花芽壞死,頂端呈短小束狀,主莖受侵後在癒合壞死斑上部表現腫脹,癒合斑部分或全部裂開,在出現癒合斑的部位剝開樹皮,樹皮內側變厚,多孔,癒合斑連線處有不明顯的線,在這條線相對方向的形成層表面也有一類似的線,沿著這條線有一小的深溝或一條光滑的細縫,壞死的樹皮覆蓋在溝或縫上。

(圖)番茄環斑病毒番茄環斑病毒

5. 桃樹和李屬其它樹種上的症狀:ToRSV與桃樹黃芽花葉株系共同侵染桃樹,沿中脈產生扁橢圓形羽緣狀病斑,由灰綠色變為淺綠色,芽發育成為小而變形的叢生葉,成淺黃色而死亡。花無症狀,但果實矮縮和畸形。ToRSV有些株系能使桃樹和李屬其它樹種產生莖溝病。

6. 天竺葵上的症狀:嫩葉產生環斑和系統性褪綠斑點,葉片畸形並產生斑駁,老葉出現株葉狀褪綠條紋,或症狀不明顯,比正常植株略顯矮。花沒有明顯退色,但變形。

7. 復盆子上的症狀:ToRSV是北美復盆子上最危險的病毒病,其症狀與品種耐病性和種植年限有關,侵染當季不表現症狀,第二年葉片表現黃色斑駁,條紋或脈褪綠,葉片生長推遲,病株表現不結果或形成易碎果。

形態特徵

ToRSV粒子為等軸對稱球狀二十面體,直徑20納米(Fig.7)。經蔗糖剃度離心純化,分成三個組分,即上、中、下層(Schneider et al.,1974;Allen & Dias,1977)。上、中、下組分沉降係數(S20,w)分別為53s、119s、127s。上層為無RNA的蛋白外殼(Fig.6),中、下層比率為1:1,經密度剃度離心和氯化銫沉降厚,中、下組分形成兩條近距離條帶。

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