多核苷酸磷酸化酶

該酶在生物體內的作用主要是催化RNA分解為核苷二磷酸,而不是起合成RNA的作用。在實驗室中,這個酶被用於人工合成多核苷酸。該酶專一性不強,由不同核苷二磷酸做底物,可以合成不同的多核苷酸聚合物。如用ADP做底物,可合成多聚A(PolyA)。 在人工合成多核苷酸時,若用多核苷酸磷酸化酶的粗製品,不需要引物就可以發生反應。若用高純度的酶製品,則反應進行很慢。如果加入少量多核苷酸或寡核苷酸作引物,可使反應一開始就較快進行。該酶在催化RNA合成時,對所需引物的基本要求是引物至少含有兩個核苷酸,3’-端的羥基必須是游離的。

概述

多核苷酸磷酸化酶
polynucleotide phospho-rylase
S.Ochoa、M.Grunberg-Monago(1955),在棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)中發現的酶,廣泛存在於微生物中。催化(NMP)
因為對核苷酸的特異性低,可以用來合成各種多聚物。也可以由大腸桿菌、藤黃微球菌(Micro-coccus luteus)精製出高純度的酶,分子量均約20萬,性質也相同。聚合反應時有作為引物(primer)的寡核苷酸起作用,對於反應速度幾乎沒有影響。另一方面,逆反應是從RNA或多聚物的3′-OH末端逐級水解的。

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