放散就是從紅細胞上把抗體解離下來，從紅細胞上去除抗體的方法就是放散試驗，它可用於ABO亞型的鑑定、新生兒溶血病的診斷和自身免疫性溶血性貧血患者紅細胞的抗體特異性的鑑定，以及吸收後把抗體再放散下來進行鑑定或製備單特異性抗體，是免疫血清學實驗中非常重要的技術手段。
用品準備
加熱放散法
①取具有相應抗原紅細胞的抗凝血離心、吸去血漿，加大量生理鹽水洗滌3次，離心取壓積紅細胞備用；
紅細胞②取受檢者血清5ml，加上述壓積紅細胞1ml。若查IgG抗體混勻後放37℃水浴1h，若查IgM抗體混勻後放4℃冰櫃1h，在此期間混合5—6次；
③取出後離心，吸出上清液棄去，用生理鹽水洗滌紅細胞3次，離心去上清液、留壓積紅細胞；
④將預熱56℃的AB型(經選擇無抗A、抗B、抗H、抗Rh等抗體者)血清或生理鹽水加入等量壓積紅細胞內，放入56℃水浴中不斷搖動7min；
⑤取出後立即以3000r/min離心5min(離心管的套管內加56℃溫水保溫)，離心後櫻紅色的上清液即為放散液，立即
結果判讀：放散液與相應的抗原紅細胞發生凝集，表示受檢者血清中有相應的抗體。
乙醚放散法
(1)紅細胞處理同加熱放散試驗操作方法中的①～③。
乙醚化學結構(2)取試管1支，將洗滌過的1份紅細胞加1份生理鹽水、2份乙醚，用玻璃紙蓋住管口，手指壓住，用力上下晃動10min，以 3000r/min離心5min，吸取底部液體即為放散液(一般分3層：上層為乙醚，中層為紅細胞基質、下層為放散液)，若混濁可再離心1次取上清液。
(3)將放散液置37℃水浴中30min，促使乙醚揮發。
(4)用放散液與相應抗原作酶法或抗人球蛋白法測抗體。
檢查原理
ABO抗原受控於A、B、H基因，不同個體紅細胞膜上表達不同的抗原，形成了A、B、O、AB四種型別。ABO血型系統的共同特點是紅細胞上含有某種抗原，血清中就不存在對應抗體。ABO血型系統正常型別和絕大多數亞型個體均符合這種規律，故可根據此規律用血型單克隆抗體檢測紅細胞上的抗原(正定型)，或用標準紅細胞檢測檢者血清中的抗體(反定型)來判斷被檢者血型。
引起ABO正反定型不一致的原因除技術操作失誤外主要有以下原因：
AB型檢測1 血液中存在IgM性質的自身冷抗體：由於自身冷抗體(冷凝集病，CHD)而導致自身溶血的病人，在低於37℃時血細胞自發凝集，影響正反定型；
2 紅細胞抗原表達弱或缺失：A、B抗原的表達可在白血病和H基因變異情況下被抑制導致A、B抗原表達太弱；
3 血液中含高水平可溶性血型物質：極少數有卵巢囊腫的婦女，由於含高濃度的可溶性血型物質，使抗原減弱或消失，此血型物質分泌進入血液可以中和抗-A或抗-B。當使用未洗滌的紅細胞用於ABO 定型時，血型物質就會中和抗-A或抗-B，引起假陰性反應；
4 新生兒、免疫缺陷或紊亂病人及老年人出現抗-A、抗-B抗體缺失或下降；
5 紅細胞的多凝集現象：紅細胞具有不正常的膜結構，可被正常成人血清凝集。起因是微生物酶引起膜的改變，以及膜上糖基合成不完善；
6 血液中不正常血清蛋白：白蛋白/球蛋白比例失調的血清引起紅細胞產生緡錢狀假凝集。特殊的正反定型不符的樣本，首先通過ABO以外抗體篩查和直接抗人球蛋白試驗排除由於不規則抗體引起的正反定型不符的可能後，就需要採用更敏感的方法來重新鑑定血型。吸收放散法是一種重要而且實用敏感的血清學方法，吸收即為用紅細胞（抗原）在最適條件下充分吸收抗體，而放散則是將吸附於紅細胞上的抗體用物理或化學的方法使其脫離下來，再採用指示應重視紅細胞反映試驗結果。吸收和放散的過程實際起到了濃縮抗體和抗體的粗純化的作用，而這些抗體可以來自於血清中的弱抗體，也可以是紅細胞上弱抗原吸附的試劑抗體，因此，吸收放散法可以用於檢測抗原，也可以用於檢測抗體。
在條件有限的情況下，靈活運用吸收放散法，也能夠準確鑑定ABO血型。
注意事項
測定放散抗體所用方法與測定抗體時相同，原來用酶介質，仍用酶介質；放散液用AB型血清製備可保存較久，放散抗體時必須振搖，才易於解離；加熱放散必須保持56℃放散後立即分離紅細胞，否則抗體抗原會重新結合；本試驗適用於放散ABO、Rh等抗體。
