表位文庫

漢灘病毒M片段噬菌體表位文庫的構建及篩選 通過構建漢灘病毒M片段的噬菌體展示文庫,篩選漢灘病毒包膜蛋白的抗原表位。噬菌肽庫是以噬菌體為載體,某一特定長度短肽的集合體,包括表位文庫及抗體庫,其中表位文庫在確定抗原表位,細胞因子及其受體的研究,蛋白質配基,拮抗劑和激動劑以及疫苗研製等方面正日益顯示其重要作用。

簡介

漢灘病毒M片段噬菌體表位文庫的構建及篩選

通過構建漢灘病毒M片段的噬菌體展示文庫,篩選漢灘病毒包膜蛋白的抗原表位。方法 DNaseⅠ隨機消化的M片段與載體pComb3連線,轉化宿主XL-1Blue,在輔助噬菌體VCSM13存在的條件下,獲得M片段的隨機噬菌體文庫.利用純化的恢復期病人血清對M片段噬菌體文庫進行3輪淘洗,通過ELISA、序列分析對所獲得的克隆進行鑑定。並對其中2個陽性克隆的目的片段進行了原核表達和免疫原性分析。結果 篩選獲得的5個陽性噬菌體克隆均位於G1蛋白編碼區,原核表達的2個陽性:充隆片段蛋白免疫兔,免疫兔血清能與病毒抗原發生特異反應。結論 本技術路線可用於漢灘病毒包膜蛋白抗原表位的研究,為漢灘病毒診斷試劑的研製、亞單位疫苗的設計提供了數據。

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噬菌肽庫是以噬菌體為載體,某一特定長度短肽的集合體,包括表位文庫及抗體庫,其中表位文庫在確定抗原表位,細胞因子及其受體的研究,蛋白質配基,拮抗劑和激動劑以及疫苗研製等方面正日益顯示其重要作用。

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