鈣鹽法

鈣鹽法是大腸桿菌轉化的常用方法。 於1972年發現的。 Ca2+處理的感受態細胞,該方法簡單、快速、穩定,重複性好,菌體適用範圍廣。

基本資料:

鈣鹽法大腸桿菌轉化的常用方法。該方法最先是由Cohen於1972年發現的。其原理是細菌處於0攝氏度,CaCl2的低滲溶液中,菌細胞膨脹成球形,轉化混合物中的DNA形成抗DNAase的羥基-鈣磷酸複合物粘附於細胞表面,經42攝氏度短時間熱衝擊處理,促使細胞洗手DNA複合物,在豐富培養基上生長數小時後,球狀細胞復原並分裂增殖,被轉化的細胞中,重組子中的基因得到表達,在選擇培養基平板上,可選擇出所需的轉化子。

Ca2+處理的感受態細胞,該方法簡單、快速、穩定,重複性好,菌體適用範圍廣。

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