緩衝物質

一般弱酸或弱鹼與其鹽(強電解質)的混合物顯有緩衝作用,具有這種作用的系統稱為緩衝系統。在緩衝系統中雖有的以固態加入,但大多數情況全部物質都進行溶解,此稱為緩衝液(buffer solution)。

物質簡介

人體在新陳代謝過程中,會產生許多酸性物質,如乳酸碳酸;人的食物(如蔬菜水果)中往往含有一些鹼性物質,如碳酸鈉。這些酸性鹼性的物質進入血液,就會使血液的PH發生變化。但是,通過實際測定發現,正常人血液的PH通常在7.35-7.45之間,變化範圍是很小的。這是什麼原因呢?原來,血液中含有許多對對酸鹼度起緩衝作用的物質——緩衝物質,每一對緩衝物質都是由一種弱酸和相應的一種強酸鹽組成的。這樣,由於血液中緩衝物質的調節作用,可以使血液的酸鹼度不會發生很大的變化,從而維持在相對穩定的狀態。
一般弱酸或弱鹼與其鹽(強電解質)的混合物顯有緩衝作用,具有這種作用的系統稱為緩衝系統。在緩衝系統中雖有的以固態加入,但大多數情況全部物質都進行溶解,此稱為緩衝液(buffer solution)
溶液的pH可由酸及其鹽的濃度比的改變而適當決定。當在此溶液中加入強鹼BOH,它與溶液中的弱酸HA之間發生HA+B+OH-→H2O+BA-的中和反應,此時OH-消失。另外在加入強酸Ha時,與鹽MA起反應,而成為M+A-+H+a-→HA+M+a-,此時則H消失。這樣弱酸及其鹽的混合溶液都消除了所加入的H和OH-離子。弱鹼及其鹽的混合溶液也是一樣的。生物體的原生質血漿等是具備這樣性質的一種緩衝液,因此常顯示保持一定pH的傾向(衡穩狀態)。構成生物體內的緩衝系統的無機酸或鹽類,是碳酸和碳酸氫鹽(碳酸緩衝系統)以及亞磷酸鹽磷酸鹽(磷酸緩衝系統),在血液中前者起主要作用,在組織細胞中後者起主要作用,但成為兩性離子的蛋白質(在血液中是血紅蛋白和血漿蛋白)或胺基酸的作用也很大。還有在生物學實驗中,用作器官或組織的介質的溶液常常需要緩衝液,為此有磷酸緩衝液乙酸緩衝液等各種配方。

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緩衝溶液buffersolution

緩衝液是一種能在加入少量酸或鹼時抵抗pH改變的溶液。PH緩衝系統對維持生物的正常pH值,正常生理環境起重要作用。多數細胞僅能在很窄的pH範圍內進行活動,而且需要有緩衝體系來抵抗在代謝過程中出現的pH變化。在生物體中有三種主要的pH緩衝體系,它們時蛋白質重碳酸鹽緩衝體系。每種緩衝體系所占的分量在各類細胞和器官中是不同的。

在生化研究工作中,常常要用到緩衝溶液來維持實驗體系的酸鹼度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到我們工作的成效。如果提取酶實驗體系的pH值變化或變化過大,會使酶活性下降甚至完全失活。所以我們要學會配製緩衝溶液。

由弱酸及其鹽組合一起使具有緩衝作用。生化實驗室常常用的緩衝系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris(三羥甲基氨基甲烷)等系統,在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩衝體系,因為有時影響實驗結果的因素並不是緩衝液的pH值,而是緩衝液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩衝劑都可能產生不需要的反應。

硼酸鹽:硼酸鹽與許多化合物形成復鹽、如蔗糖。

檸檬酸鹽:檸檬酸鹽離子容易與鈣結合,所以存在有鈣離子的情況下不能使用。

磷酸鹽:在有些實驗,它是酶的抑止劑或甚至是一個代謝物,重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉澱出來。而且它在pH7.5以上時緩衝能力很小。

三羥甲基氨基甲烷:它可以和重金屬一起作用,但在有些系統中也起抑止的作用。其主要缺點時溫度效應。這點往往被忽視,在室溫pH是7.8的Tris一緩衝液,在4℃時是8.4,在37℃時是7.4,因此,4℃配製的緩衝液拿到37℃測量時,其氫離子濃度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下,緩衝能力很差。

緩衝液的pH值由哪些因素決定?

設緩衝系統的弱酸的電離常數為K(平衡常數),平衡時弱酸的濃度為[酸],弱酸鹽的濃度為[鹽],則由弱酸的電離平衡式可得下式:

根據此式可得出下列幾點結論:

(1)緩衝液的pH值與該酸的電離平衡常數K及鹽和酸的濃度有關。弱酸一定,但酸和鹽的比例不同時,可以得到不同的pH值。當酸和鹽濃度相等時,溶液的pH值與PK值相同。

(2)酸和鹽濃度等比例也增減時,溶液的pH值不便。

(3)酸和鹽濃度相等時,緩衝液的緩衝效率為最高,比例相差越大,緩衝效率越低,一般地說緩衝液有效緩衝範圍為PK±1pH。

從上述可知,只要知道緩衝對的PK值,和要配製的緩衝液的pH值(及要求的緩衝液總濃度)時,可按公式計算出[鹽]和[酸]的量。這樣算涉及到對數的換算,較麻煩,前人為減少後人的計算麻煩,經計算已為我們總結出pH值與緩衝液對離子用量的關係列出了表格。講義附錄部分節錄有磷酸緩衝液的配製表。只要我們知道要配製的緩衝液的pH,經查表便可計算處所用緩衝劑的比例和用量。例如配製500nmpH5.8濃度為0.1M磷酸緩衝液。

經查表知pH5.8濃度為0.2MNa2HPO48.0毫升,而0.2MNa2HPO492.0毫升。依此可推論出配製100ml0.1M的磷酸緩衝液需要0.1MNa2HPO48.0毫升,而0.1MNa2HPO4需要92.0毫升。

計算好後,按計算結果稱好藥品,放於燒杯中,加少量蒸餾水溶解,轉移入50ml容量瓶,加蒸餾水至刻度,搖勻,便得所需的緩衝液。

各種緩衝溶液的配製,均按下表按比例混合,某些試劑,必須標定配成準確的濃度才能進行,如醋酸、NaOH等。

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