病理檢查

病理檢查

用以檢查機體器官、組織或細胞中的病理改變的病理形態學方法。為探討器官、組織或細胞所發生的疾病過程,可採用某種病理形態學檢查的方法,檢查他們所發生的病變 ,探討病變產生的原因、發病機理、病變的發生髮展過程,最後做出病理診斷。病理形態學的檢查方法,首先觀察大體標本的病理改變,然後切取一定大小的病變組織,用病理組織學方法製成病理切片,用顯微鏡進一步檢查病變。

概述

病理檢查 (pathological examination) 已經大量套用於臨床工作及科學研究。在臨床方面主要進行屍體病理檢查及手術病理檢查。手術病理檢查的目的,一是為了明確診斷及驗證術前的診斷,提高臨床的診斷水平;二是診斷明確後,可決定下步治療方案及估計預後,進而提高臨床的治療水平。通過臨床病理分析,也可獲得大量極有價值的科研資料。

單純形態學觀察進行病理診斷的方法,即純定性的方法、形態學的方法僅能進行粗略的定量估計,如根據瘤細胞的核分裂數目,尤其是病理性核分裂來判斷惡性腫瘤的惡性變 。

20世紀90年代病理檢查進入組化、免疫組化、分子生物學及癌基因檢查。 隨著自然科學的迅速發展,新儀器設備和技術套用到醫學中來, 超微結構病理、分子病理學、免疫病理學、遺傳病理學等方法也都套用到病理檢查中。

腫瘤的病理學檢查方法

腫瘤的病理學檢查為極其重要的腫瘤診斷方法之一。病理學檢查可以確定腫瘤的診斷、組織來源以及性質和範圍等,為臨床治療提供重要的依據。腫瘤的病理學檢查方法包括:

常規的病理形態學檢查

1.脫落細胞學檢查常用的有陰道分泌物塗片檢查子宮頸癌,痰塗片檢查肺癌,胸、腹水離心後作塗片檢查胸腔或腹腔的原發或轉移癌和尿液離心後塗片檢查泌尿道腫瘤等。我國醫務工作者研製成食管細胞採取器(食管拉網法)檢查食管癌及賁門癌(陽性確診率為87.3%~94.2%)。還用鼻咽乳膠球細胞塗片、負壓吸引細胞法及泡沫塑膠海綿塗片法等採取鼻咽分泌物檢查鼻咽癌,提高了陽性診斷率(陽性率為88%~92%)。用胃加壓沖洗法採取胃內容物檢查胃癌,也使陽性診斷率有了顯著的提高。

2.活體組織檢查 從患者身體的病變部位取出小塊組織(根據不同情況可採用鉗取、切除或穿刺吸取等方法)或手術切除標本製成病理切片,觀察細胞和組織的形態結構變化,以確定病變性質,作出病理診斷,稱為活體組織檢查(biopsy),簡稱活檢。這是診斷腫瘤常用的而且較為準確的方法。近年來由於各種內窺鏡(如纖維胃鏡、纖維結腸鏡、纖維支氣管鏡等)和影像診斷技術的不斷改進,不但可以直接觀察某些內腫瘤的外觀形態,還可在其指引下準確地取材,進一步提高了早期診斷的陽性率。

新開展的檢查方法

免疫組織化學檢查

免疫組化是最近10多年來迅速發展起來的一門新興技術。它已被廣泛運用腫瘤研究和診斷,其原理是利用抗原與抗體的特異性結合反應來檢測組織中的未知抗原或者抗體,主要是腫瘤相關抗原(腫瘤分化抗原和腫瘤胚胎抗原),藉以判斷腫瘤的來源和分化程度,協助腫瘤的病理診斷和鑑別診斷。目前常用的染色方法有過氧化物酶-抗過氧化物酶法,即PAP法(peroxidaseantiperoxidase technique)和卵白素-生物素-過氧化物酶複合物法,即ABC法(avidin-biotin-peroxidase complex technique)。利用免疫組織化學方法已經可以對許多常規方法難以判斷其來源的腫瘤加以鑑別。例如檢測細胞骨架的中間絲(intermediate filament),其直徑平均為10nm,介於微管和微絲之間。中間絲有五類:即神經原纖維、膠質原纖維酸性蛋白、結蛋白(desmin)、波形蛋白(vimentin)和角蛋白(keratin)。它們各有生物化學和免疫學特性,並分別存在於不同類型的細胞中,故具有相對的特異性,可用來協助診斷相應的神經細胞、神經膠質細胞、橫紋肌和平滑肌、間葉組織和上皮細胞來源的腫瘤。利用激素和激素受體的特異性結合,還可以對乳腺癌等激素依賴性腫瘤的雌激素受體、孕激素受體的水平進行免疫組化測定。雌激素受體陽性者對於內分泌治療的效果較好,預後也優於受體陰性的病人。

能用於腫瘤輔助診斷和鑑別診斷的抗體已不勝枚舉。由於經驗的積累,過去認為在診斷某些腫瘤上具有特異性的抗體也不是那樣特異了。因此在判斷結果時必須緊密地結合形態學和臨床改變。

電子顯微鏡檢查

電子顯微鏡檢查迄今尚未發現可據以診斷腫瘤和惡性腫瘤的特異性的超微結構改變。因此要鑑別是否為腫瘤和腫瘤的良惡性仍主要靠光鏡觀察。但電鏡在確定腫瘤細胞的分化程度,鑑別腫瘤的類型和組織發生上可起重要作用。例如鑑別分化差的癌及肉瘤;區分各種惡性小圓細胞腫瘤,如神經母細胞瘤、Ewing肉瘤、胚胎性橫紋肌肉瘤、惡性淋巴瘤及未分化小細胞癌。

在電鏡下,癌細胞之間常見較多的橋粒連線或橋粒樣連線,因而可與肉瘤相區別。在惡性小圓細胞腫瘤中,各類腫瘤也有其超微結構特點,如神經母細胞瘤常見大量樹狀細胞突,在瘤細胞體及胞突中均可查見微管和神經分泌顆粒;Ewing肉瘤的瘤細胞常分化差,胞漿內細胞器很少,但以大量糖原沉積為其特點:胚胎性橫紋肌肉瘤可見由肌原纖維和Z帶構成的發育不良的肌節;小細胞癌常可見細胞間連線和胞漿內神經分泌顆粒;惡性淋巴瘤除可見發育不同階段淋巴細胞的超微結構特點外,不見細胞連線、神經分泌顆粒、樹狀胞突和糖原沉積,從而可與其他小圓細胞腫瘤區別。

流式細胞術

流式細胞術(flow cytometry)是一種快速定量分析細胞的新技術,已廣泛用於腫瘤研究,特別是套用於瘤細胞DNA含量的檢測。許多資料表明,實體惡性腫瘤的DNA倍體大多為非整倍體或多倍體,所有良性病變都是二倍體。檢測異常DNA含量不但可作為惡性腫瘤的標誌之一,且可反映腫瘤的惡性程度及生物學行為。

圖像分析技術

病理形態學的觀察基本上是定性的,缺乏精確而更為客觀的定量標準。圖像分析技術(image analysis)的出現彌補了這個缺點。隨著電子計算機技術的發展,形態定量技術已從二維空間向三維空間發展。在腫瘤病理方面圖像分析主要套用於核形態參數的測定(區別癌前病變和癌;區別腫瘤的良惡性;腫瘤的組織病理分級及判斷預後等),DNA倍體的測定,顯色反應(如免疫組織化學)的定量等方面。

分子生物學技術

十餘年來分子生物學腫瘤研究領域引起了一場革命。重組DNA技術、核酸分子雜交技術、聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)和DNA測序等新技術在腫瘤的基因分析和基因診斷上已經開始套用。例如對惡性淋巴瘤,利用Southern印跡雜交技術和PCR方法,可以對樣本淋巴組織中是否存在單克隆性的增生做出判斷,從而協助形態學診斷。這些技術還被用於腫瘤的病因和發病學研究。

熱休克蛋白90α(Hsp90α)癌前篩查

2013年羅永章教授領導的清華大學抗腫瘤蛋白質藥物國家工程實驗室在世界上首次報導了腫瘤細胞特異分泌Hsp90α的調控機理,同時首次揭示了分泌到細胞外的Hsp90α與細胞內Hsp90α的分子差異,並進一步證明了分泌型Hsp90α能促進腫瘤侵襲及轉移,且其在血液中的含量與腫瘤惡性程度正相關。

到慈銘體檢抽一滴血就可以檢測出是否罹患癌症,這項發現適用於多種癌症檢測。

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