尿卟啉原脫羧酶

尿卟啉原脫羧酶

尿卟啉原脫羧酶活性的分離的多肽和編碼該多肽的分離的核酸序列。本發明也涉及包含該核酸序列的核酸構建體、載體和宿主細胞，以及產生和套用該多肽的方法。一種具有尿卟啉原脫羧酶活性的分離的多肽，其選自：(a)一種多肽，其具有與SEQIDNO∶2的胺基酸序列至少有65％同一性的胺基酸序列；(b)由一種核酸序列編碼的多肽，該核酸序列在中度嚴格條件下可與(ⅰ)SEQIDNO∶1的核酸序列或(ⅱ)其互補鏈或其至少100個核苷酸的亞序列雜交；(c)(a)或(b)的等位變體；和(d)(a)、(b)或(c)的一種片段，其中該片段具有尿卟啉原脫羧酶活性。　

介紹

尿卟啉原脫羧酶

尿卟啉原Ⅲ脫羧酶是植物血紅素和葉綠素合成的一個關鍵調控酶。對生玉米葉片中葉綠素含量較比互生玉米高。對生玉米幼苗經硫酸銨分級沉澱,DEAESepharoseCL-6B、SephacrylS-200、羥基磷灰石和BlueSepharoseCL-6B層析,純化了尿卟啉原脫羧酶。純化倍數為1060倍,得率約8%,比活約880U/mg蛋白。純化的UROD在SDS/PAGE顯示一條帶,亞基分子量約為40kD,SephacrylS-300測得全酶分子量約為55kD。IEF-PAGE顯示UROD為一條帶,等電點約為6.0,酶的最適pH值約7.0,在55℃下保溫12min,酶活力喪失90%,在100mmol/L的巰基乙醇下,UROD的酶活力提高7倍。體外5mmol/L的磷酸吡哆醛修飾顯示UROD活力下降約30%。

植物中有功能的卟啉類化合物如葉綠素、血紅素和西羅血紅素作為和蛋白結合的輔因子,分別參與植物光合作用、呼吸代謝及氧化作用、氮和硫的同化。它們在植物體內的生物合成的最後一個共有底物是尿卟啉原Ⅲ。