細胞原代培養

原代培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官後立即進行培養。 但實際上,通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。 最常用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。

簡介

原代培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官後立即進行培養。因此,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養,此時的細胞保持原有細胞的基本性質,如果是正常細胞,仍然保留二倍體數。但實際上,通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。

基本原理

最常用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。

組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上,加入培養基後進行培養。

分散培養則是將組織塊用機械法或化學法使細胞分散。如欲從胎兒或新生兒的組織分離到活性最好的游離細胞,經典的方法是用蛋白水解酶(如胰蛋白酶和膠原酶)消化細胞間的結合物, 或用金屬離子螯合劑(如EDTA)除去細胞互相粘著所依賴的Ca2+ , 再經機械輕度振盪, 使之成為單細胞。

套用價值

細胞培養技術是細胞工程的基礎,實驗室規模的細胞培養與工業規模的細胞培養又是有所不同的。很多生物類藥物(見基因治療)都要求較嚴格的細胞培養技術。

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