沙門氏桿菌

沙門氏桿菌

沙門氏菌屬是一大群寄生於人類和動物腸道內生化反應和抗原構造相似的革蘭氏陰性桿菌統稱為沙門氏桿菌。1880年Eberth首先發現傷寒桿菌,1885年Salmon分離到豬霍亂桿菌,由於Salmon發現本屬細菌的時間較早,在研究中的貢獻較大,遂定名為沙門氏菌屬。

基本信息

分類

根據其對宿主的致病性,可分為三類:①對人致病;②對人和動物均致病;③對動物致病。與人類關係密切的沙門氏菌有:傷寒沙門氏菌,甲、乙、丙型副傷寒沙門氏菌,鼠傷寒沙門氏菌,豬霍亂沙門氏菌,腸炎沙門氏菌等十餘種。一般可簡稱傷寒桿菌,甲、乙、丙型副傷寒桿菌,鼠傷寒桿菌,豬霍亂桿菌,腸炎桿菌。

性狀

(一)形態與染色

大小0.6-1.0×2-3um,無芽胞,一般有鞭毛,無莢膜,多數有菌毛,革蘭氏陰性桿菌

(二)培養特性

兼性厭氧菌,在普通瓊脂平板上形成中等大小、半透明的S型菌落。在腸道桿菌選擇性培養基上形成無色菌落。

(三)生化反應

不發酵乳糖和蔗糖不產生吲哚,不分解尿素,VP試驗陰性,大多產生硫化氫。發酵葡萄糖、麥芽糖和甘露醇,除傷寒桿菌產酸不產氣外,其他沙門氏菌均產酸產氣。

(四)抗原構造與分類

主要有O和H兩種抗原。少數菌具有表面抗原,功能與大腸桿菌的K抗原相似,一般認為與毒力有關,故稱Vi抗原。

1.O抗原:為脂多糖,性質穩定。能耐100℃達數小時,不被乙醇或0.1%石炭酸破壞。決定O型原特異性的是脂多糖中的多糖側鏈部分,以1、2、3等阿拉伯數字表示。例如乙型副傷寒桿菌有4、5、12三個。鼠傷寒桿菌有1、4、5、12四個;豬霍亂桿菌有6、7二個。其中有些O抗原是幾種菌所共有,如4、5為乙型副傷寒桿菌和鼠傷寒桿菌共有,將具有共同O抗原沙門氏菌歸為一組,這樣可將沙門桿氏菌屬分為A-Z、O51-O63、O65-O67共有42組。中國已發現26個菌組、161個血清型。使人類致病的沙門氏桿菌大多屬於A-E組。O抗原刺激機體主要產生lgM抗體。

2.H抗原:為蛋白質,對熱不穩定,60℃經15分鐘或乙醇處理被破壞。具有鞭毛的細菌經甲醇液固定後,其O抗原全部被H抗原遮蓋,而不能與相應抗O抗體反應。H抗原的特異性取決於多肽鏈上胺基酸的排列順序和空間構型。

沙門氏桿菌的H抗原有兩種,稱為第1相和第2相。第1相特異性高,又稱特異相,用a、b、c等表示,第2相特異性低,為數種沙門氏桿菌所共有,也稱非特異相,用1、2、3等表示。具有第1相和第2相H抗原的細菌稱為雙相菌,僅有一相者稱單相菌。每一組沙門氏桿菌根據H抗原不同,可進一步分種或型。H抗原刺激機體主要產生lgG抗體。

3.Vi抗原:因與毒力有關而命名為Vi抗原。由聚-N-乙醯-D-半乳糖胺糖醛酸組成。不穩定,經60℃加熱、石碳酸處理或人工傳代培養易破壞或丟失。新從患者標本中分離出的傷寒桿菌、丙型副傷寒桿菌等有此抗原。Vi抗原存在於細菌表面,可阻止O抗原與其相應抗體的反應。Vi抗原的抗原性弱。當體內菌存在時可產生一定量抗體;細菌被清除後,抗體也隨之消失。故測定Vi抗體有助於對傷寒帶菌者的檢出。

(五)噬菌體分型

有些沙門氏菌在血清學分型的基礎上,可借噬菌體進一步分型。傷寒桿菌各菌株的Vi抗原在血清學上的特異性是一致的,但對噬菌體有不同的敏感性,可用噬菌體裂解試驗分為96個噬菌體型。中國常見者有12個型。傷寒桿菌的噬菌體分型在追蹤傳染源及發現新型菌株上有實際意義。

(六)抵抗力

對熱抵抗力不強,60℃1小時或65℃經15-20分鐘可被殺死。在水中能存活2~3周,類便中可活1-2個月,可在冰凍土壤中過冬。膽鹽、煌綠等對屬細菌的抑制作用較對其他腸道桿菌為小,故可用其製備腸道桿菌選擇性培養基,利於分離糞便中的沙門氏菌。

(七)變異

1.H-O變異:指有動力的H型菌株失去鞭毛成為無動力的O型菌體。

2.S-R變異:S型菌落在培養基上多次移種後,逐漸失去O抗原變為R型菌落,細菌的毒力也隨之消失。

3.V-W變異:指有Vi抗原的菌株(V型)失去Vi抗原(W型),即細菌與抗O血清凝集而不再與抗Vi血清凝集,稱為V-W變異。

4.位相變異:將具有第1相和第2相H抗原的沙門氏桿菌接種於瓊脂平板上,所得單個菌落,有些是第1相,有些是第2相。如任意挑選一個菌落(第1相或第2相),在培養基上多次移種後,其後代又出現部分是第1相、部分是第2相的不同菌落。

致病性

(一)致病物質
沙門氏桿菌雞沙門氏桿菌症

1.侵襲力:沙門氏桿菌侵入小腸黏膜上皮細胞,穿過上皮細胞層到達上皮下組織。細菌雖被細胞吞噬,但不被殺滅,並在其中繼續生長繁殖。這可能與Vi抗原和O抗原的保護作用有關。菌毛的粘附作用也是細菌侵襲力的一個因素。

2.內毒素:引起發熱、白細胞減少。大劑量時可發生中毒性休克。內毒素可激活補體系統釋放趨化因子,吸引粒細胞,導致腸道局部炎症反應。

3.腸毒素:有些沙門氏桿菌,如鼠傷寒桿菌可產生腸毒素,性質類似腸產毒性大腸桿菌的腸毒素。

(二)人類的沙門氏菌病

1.腸熱症:是傷寒病和副傷寒病的總稱,主要由傷寒桿菌和甲、乙、丙型副傷寒桿菌引起。

典型傷寒病的病程較長。細菌到達小腸後,穿過腸黏膜上皮細胞侵入腸壁淋巴組織,經淋巴管至腸系膜淋巴結及其他淋巴組織並在其中繁殖,經胸導管進入血流,引起第一次菌血症。此時相當病程的第1周,稱前驅期。病人有發熱、全身不適、乏力等。細菌隨血流至骨髓、肝、脾、腎、膽囊、皮膚等並在其中繁殖,被臟器中吞噬細胞吞噬的細菌再次進入血流,引起第二次菌血症。此期症狀明顯,相當於病程的第2-3周,病人持續高熱,相對緩脈,肝脾腫大及全身中毒症狀,部分病例皮膚出現玫瑰疹。存於膽囊中的細菌隨膽汁排至腸道,一部分隨糞便排出體外。部分菌可再次侵入腸壁淋巴組織,出現超敏反應,引起局部壞死和潰瘍,嚴重者發生腸出血和腸穿孔。腎臟中的細菌可隨尿排出。第4周進入恢復期,患者逐漸康復。

典型傷寒的病程約3~4周。病癒後部分患者可自糞便或尿液繼續排菌3周至3個月,稱恢復期帶菌者。約有3%的傷寒患者成為慢性帶菌者。

副傷寒病與傷寒病症狀相似,但一般較輕,病程較短,約1-3周即愈。

2.急性腸炎(食物中毒):是最常見的沙門氏桿菌感染。多由鼠傷寒桿菌、豬霍亂桿菌、腸炎桿菌等引起。系因食入未煮熟的病畜病禽的肉類、蛋類而發病。潛伏期短,一般4-24小時,主要症狀為發熱、噁心、嘔波士頓、腹痛、腹瀉。細菌通常不侵入血流,病程較短,一般2-4天內可完全恢復。

3.敗血症:常由豬霍亂桿菌、丙型副傷寒桿菌、鼠傷寒桿菌、腸炎桿菌等引起。病菌進入腸道後,迅速侵入血流,導致組織器官感染,如腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、腎盂腎炎、心內膜炎等。出現高熱、寒戰、厭食、貧血等。在發熱期,血培養陽性率高。

(三)免疫性

傷寒或副傷寒病後有牢固的免疫性,很少再感染。主要依靠細胞免疫,表現為單核巨噬細胞系統在淋巴因子的作用下,胞內酶數量增多,活性增強,從而殺死寄生在細胞內的細菌。

體液免疫方面,局部抗體較重要,尤其是SlgA具有特異性防止傷寒桿菌粘附於腸黏膜表面的能力。抗O和抗Vi抗體能抵抗病原菌的感染。至於血循環中lgM、lgG抗體對胞內寄生菌無免疫作用。

實驗診斷

(一)分離與鑑定
沙門氏桿菌雞沙門氏桿菌症

1.標本:根據傷寒病的病程採取不同標本,通常第1-2周取血液,第2-3周取糞便或尿液。急性腸炎取患者吐瀉物和剩餘食物。敗血症取血液作培養。

2.分離培養與鑑定:血液應先接種膽汗肉湯增菌;糞便和經離心的尿沉渣可直接接種腸道桿菌選擇性培養基。37℃經18~24小時培養後,挑選無色半透明的不發酵乳糖的菌落塗片、染色、鏡檢,並接種雙糖含鐵或三糖含鐵培養基。疑為沙門氏桿菌時,作生化反應和玻片凝集試驗鑑定。

3.快速診斷法:近年來套用葡萄球菌A蛋白協同凝集試驗、酶聯免疫吸附試驗、放射免疫測定等方法,檢測患者血清或尿液中傷寒桿菌、副傷寒桿菌的可溶性抗原,協助臨床早期診斷腸熱症。

(二)血清學試驗

常用肥達(Widal)氏反應。即用已知的傷寒桿菌O、H抗原和甲、乙型副傷寒桿菌的H抗原與待檢血作定量凝集試驗。根據抗體含量多少及其增長情況,輔助臨床診斷腸熱症。

腸熱症常由傷寒桿菌,甲、乙型副傷寒桿菌引起,故通常採用上述三種菌的抗原進行試驗。有的地區可由丙型副傷寒桿菌引起,應增添丙型副傷寒桿菌H抗原作試驗。

本試驗在腸熱症患者第一周末時,即可出現陽性結果。判定結果時必須考慮下述情況。

1.正常抗體水平:正常人因隱性感染或預防接種,血清中可含有一定量抗體,其效價隨各地區情況而不同。一般說來,O凝集價≥1:80、H凝集價≥1:160時才有診斷價值。

2.動態觀察:判斷肥達氏反應結果須結合臨床症狀、病期等。單次凝集效價增高,有時不能定論。如間隔數天重複採用,若效價隨病程延長而逐漸上升4倍以上,有診斷意義。

3.O與H抗體在診斷上的意義:患腸熱症後,O與H抗體在體內的消長情況不同。LgM型O抗體出現較早,持續時間僅半年左右,消失後不易受傷寒、副傷寒桿菌以外細菌的非特異性抗原刺激而重新出現。lgG型H抗體出現較晚,維持時間可長達數年,消失後易受非特異性抗原刺激而短暫地重新出現。因此,①若H、O凝集效價均超過正常值,則感染傷寒、副傷寒的可能性大;②H與O效價均低,則患腸熱症的可能性甚小;③若H效價高而O不高,可能系預防接種或非特異性回憶反應;④如O效價高而H不高,可能是感染早期或其他沙門氏菌感染(腸炎桿菌與傷寒桿菌有共同O抗原)引起的交叉反應。

4.其他:少數病例在整個病程中,肥達氏試驗始終呈陰性。可能是①發病早期曾用大量或多種抗生素治療;②患者免疫功能低下。故本試驗陰性時,不宜匆忙地否定診斷。

(三)傷寒帶菌者的檢查

最可靠的方法是分離培養病原菌,但檢出率不高。一般可先檢測可疑血清中有無Vi抗體,當效價>1:10時,再取糞便或尿液多次分離培養,才能確定。

防治原則

腸熱症的特異性免疫,以往採用皮下多次接種死菌苗,雖有一定的保護作用,但常引起局部和全身反應。

領帶鏈黴素(Sd)株和Ty-21a株減毒口服活菌苗的副反應較小,免疫效果且較持久。Ty-21a活菌苗是缺少尿苷二磷酸半乳糖-4-差向異構酶的傷寒桿菌突變株。該菌株失去合成脂多的能力,故無發熱反應,無返祖現象,服用安全,以產生細胞免疫為主,經中國、外現場試用,此菌株安全、穩定、有效免疫期至少為三年。

治療可採用氯黴素、氨苄青黴素、羥氨苄青黴素等,中藥白花蛇舌草,穿心蓮等有效。

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