糞鏈球菌

糞鏈球菌

糞鏈球菌又叫糞腸球菌。套用C多糖抗原,根據蘭氏血清學分類,可將鏈球菌分成許多群。糞鏈球菌屬於D群。D群鏈球菌分腸球菌和非腸球菌兩類。前者包括糞鏈球菌、屎鏈球菌和堅忍鏈球菌,後者有牛鏈球菌和馬腸鏈球菌。糞鏈球菌為畜禽飼料添加劑,可防治幼畜苗禽因腸道菌群失調引起的下痢,具有調節腸道正常菌群失調和促進生長的作用。

基本信息

生物學性狀

糞鏈球菌又叫糞腸球菌,其菌體形態為鏈球或球狀,菌體直徑大小0.3~0.7μm,無芽孢;稀釋後在肉湯瓊脂平板上形成的菌落圓形、乳白色,表面凸起濕潤,有光澤,邊緣整齊。大多數成雙或短鏈狀排列,通常不運動。

在豐富培養基上菌落大而光滑,直徑1~2mm,全緣,罕見色素。其營養要求低,在普通營養瓊脂上也可生長。能在10~45℃pH值9.6或含6.5%NaCl 肉湯培養基中生長,並能耐65℃

30min。它可利用精氨酸為能源,發酵山梨醇,不發酵阿拉伯糖。在簡單的培養基上生長不需葉酸

生理特性

1、糞鏈球菌分泌的乳酸為L型乳酸,又稱為自然乳酸或生理乳酸,可完全被動物吸收利用。乳酸桿菌分泌的乳酸L型和D型都有,但D型則不能被動物吸收利用,雙歧桿菌分泌的乳酸也是L型乳酸。

在動物的腸道里,pH值可顯著影響微生物的數量與類型,大部分來自食物和唾液里的微生物在腸道的酸性環境中存活很少,主要是糞鏈球菌和乳酸菌。耐酸和不耐酸的細菌在腸道中還會受到不同的抗生因子如酸、蠕動、抗體等的影響,但主要是pH值影響最大。而糞鏈球菌可在腸內形成生物薄膜附著在腸道黏膜上,可以在腸道內發育、生長、繁殖,繁殖時間很短,19min分裂一次。

糞鏈球菌還可把部分蛋白質分解成醯胺胺基酸,把大部分的碳水化合物的無氮浸出物轉化為乳酸,而且使飼料里的纖維變軟,所以飼料的轉化吸收率就較高。糞鏈球菌分解的這些特殊營養成分彌補了常規餌料的營養缺陷,對各種養殖動物幼體起到了十分重要的營養強化和促生長作用。

2、糞鏈球菌產生的抗菌物質大多是肽或蛋白質,被稱為細菌素。糞鏈球菌可分泌兩種類細菌素,一類僅只是對相關的菌有抑制作用,抗菌譜較窄,可阻礙病原微生物接觸腸黏膜細胞;另一類具有廣譜抗菌活性,它們對致病菌如:沙門氏菌、致賀氏菌和假單孢菌都有很好的抑制作用。所以,長期在飼料中添加糞鏈球菌可以減少養殖動物腸炎等疾病的發生。

糞鏈球菌在生長和代謝過程中產生對養殖動物有益的營養物質,如乳酸、胺基酸、維生素、酶及抑菌物質。在飼料添加中,既有防腐作用,又增加飼料的風味,促進養殖動物的食慾。

3、飼料中添加糞鏈球菌可減少養殖中有機物和礦物質排泄量,有效地減少水質污染。

在水產養殖水體中,添加了糞鏈球菌不僅有利於提高飼料的消化率,同時也相應降低了排泄物中的氨態氮的濃度,減少了排泄物的不消化物,改善了飼養環境,減少了污染。

糞鏈球菌除了具有一般微生物所產生的有關酶系外,它還有一些特殊的酶系,正因為有了這些酶系,才賦予它重要的生理功能。由於飼料中餅粕、麥麩等農副產品中的植酸磷含量較高,對鈣等礦物質元素利用造成影響,而在糞鏈球菌的生理作用下通過催化、水解等反應分泌出的L-乳酸,它可以對鈣質合成L-乳酸鈣,促進養殖動物對鈣質的吸收。

致病性

糞鏈球菌引起的感染有尿路感染、化膿性腹部感染、敗血症、心內膜炎和腹瀉發燒等。其中敗血症最常繼發於生殖泌尿性感染,皮膚、膽道、腸道等感染也可作為原發病灶。從天然乳清培養物中分離的菌株,能產生一種細菌素,叫腸球菌素(Enterocin),對單增李斯特氏菌有殺滅作用。

流行病學

糞鏈球菌為條件致病菌,它來源於人和溫血動物的糞便,偶爾出現於感染的尿道及急性心內膜炎。它能夠通過食品對人類造成感染,因而常見於許多食品,如火腿腸、炸肉丸、布丁及經過巴氏消毒的牛奶等,糞鏈球菌進入食物鏈的主要原因是不衛生的加工條件所致的,一般與直接的糞便感染無關。糞鏈球菌引起的感染大多是由於它的侵襲所造成,感染劑量較高,一般大於107 個細菌。人、禽感染率最高,亦見於豬、牛、馬、山羊、綿羊及兔。

檢驗與控制

檢驗

樣品製備取25g或25mL樣品,放入225mL滅菌生理鹽水中,充分混勻,製成1:10樣品稀釋液。根據樣品的污染程度,製成適當的10倍遞增稀釋液。

a.多管法:

用適當的稀釋液接種一套疊氮化鈉葡萄糖肉湯管。接種量為1mL或以下的,使用10mL單料管;接種量為10mL,使用10mL雙料管。35℃培養24-48h,並檢查記錄各管的混濁情況。用接種環將渾濁管中的培養物劃線於PSE平板上,倒置平板於36℃培養24h。平板上出現的帶棕色環的黑色菌落,確證為糞鏈球菌。根據接種的樣品量和確證為是糞鏈球菌的管數,查MPN表,報告每克樣品中的糞鏈球菌MPN值。

b.濾膜法:

傾注融化的4-5mL的KF瓊脂於平板上,若平板表面有氣泡,可用火焰灼除。根據樣品的污染程度,使用樣液的量為100,10,1.0,0.1或0.01mL。使用滅菌濾膜過濾樣液,以能在濾膜上生長出20-100個菌落為宜。將濾過樣液的濾膜緊貼在KF瓊脂培養基表面上,避免出現氣泡。倒置平板於36℃培養48h。糞鏈球菌在KF平板濾膜上形成暗紅色至粉紅色菌落。將典型菌落接種於腦心浸液斜面上,36℃培養48h。用其培養物做過氧化氫試驗,過氧化氫濃度為3%,陽性反應者為非糞鏈球菌群細菌。將陰性反應者接種於腦心浸液肉湯,置45.5℃培養48h;同樣方式接種一管膽鹽肉湯,置36℃培養3天。在上述兩種情況下生長者為糞鏈球菌。選擇生長20-100個菌落的濾膜,根據所使用的樣品量,計算出樣品每克(毫升)中的糞鏈球菌數。

c.平板計數法:

取1mL適當稀釋液加入培養皿內,傾入12-15mL的KF或PSE培養基,轉動平板充分混合。凝固後置36℃培養,KF平板培養48h,PSE平板培養24h。糞鏈球菌在KF平板上形成暗紅色至粉紅色菌落,邊緣整齊,瓊脂表面下菌落呈橢圓或晶體狀;在PSE平板上形成帶棕色環的棕黑色菌落。選擇有30-300個菌落的平板進行記數。按糞鏈球菌數/g(mL)報告結果。

控制

由於糞鏈球菌可通過食物對人類造成感染,所以應從以下幾個方面加以控制:

加強生產區域的衛生管理,由於糞鏈球菌主要來源於人畜糞便,所以廁所要合理布局,避免糞便直接污染;生產人員要嚴格執行個人衛生制度。

在加工過程中,嚴格注意每個關鍵點的控制,掌握好諸如溫度、水源衛生等要素。對擺放時間過長的食物,如熟食製品、牛奶或奶製品等,要徹底加熱再食用,春夏季尤其要注意。

用法與用量

作飼料添加劑,按規定比例拌入飼料,雛雞飼料0.1%~0.2%、成年雞飼料0.1%、子豬飼料0.1%~0.22%、肉豬飼料0.1%、兔飼料0.1%~0.2%。或子雞每日每羽0.1~0.22g,子豬每日每頭0.2~0.5g。治療量加倍。

注意事項

糞鏈球菌不得與抗菌藥物同時使用,切勿用50℃以上熱水溶解。

儲藏

避光乾燥陰涼處,室溫下保存,有效期為6個月。

益生菌

益生菌是指維持腸道微生物平衡的有機體,是存在於自然界的有益微生物。目前益生菌已被套用於飼料、農業、醫藥保健和食品等各領域。在飼料工業上多採用地衣芽孢桿菌和蠟狀芽孢桿菌,在農業上多採用蘇芸金桿菌和蠟狀芽孢桿菌,在醫藥保健多採用乳酸菌、雙岐桿菌和腸球菌,在食品上多採用酵母菌等。

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