PCR-SSCP分析技術

PCR-SSCP分析技術是一種基於單鏈DNA構象差別的快速、敏感、有效地檢測基因點突變的DNA多態方法。其基本原理是對已知有基因點突變的遺傳病，在其突變位點附近設計引物進行PCR擴增，將擴增的產物取出一部分（一般為1pl），變性後在不含變性劑的中性聚丙烯醯肢凝膠中電泳，由於單鏈DNA中鹼基配對或聚集，當溫度或變性劑等環境改變會引起不同的構象。

相同長度的單鏈DNA因其鹼基順序不同，甚至單個鹼基的差異會形成不同的構象從而導致電泳時泳動速度不同。如靶DNA中發生鹼基替代等改變時就會出現泳動變位，從而鑑別有無基因突變。例如，無過氧化氫酶症是一種常染色體隱性遺傳病，患者過氧化氫酶活性只有正常人的0.2%~0.4%，雜合體血液中過氧化氫酶活性則處於中間水平。過氧化氫酶基因由13個外顯子和12個內含子組成。套用”P標記PCR反應中底物方法，擴增第4個外顯子和內含子附近的203bp片段，套用SSCP法可清楚地判斷患者和雜合體。