GAPDH抗體

在WesternBloting實驗中，可能存在總蛋白濃度測定不準確，或者蛋白質樣品在電泳前上樣時產生的樣品間的操作誤差；這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉到膜上的內參，比如內參GAPDH的含量來進行校正。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脫氫酶）是參與糖酵解的一種關鍵酶，由4個30-40kDa的亞基組成，分子量146kDa，檢測條帶大約在36kDa。GAPDH基因幾乎在所有組織中都高水平表達，廣泛用作Westernblot蛋白質標準化的內參。
內參抗體雖然選擇較多，但是也需要遵循一定的原則，並契合實際的套用要求。首先，我們需要考慮目的蛋白的大小，我們推薦內參要與檢測的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上，因此你需要根據你目的檢測蛋白的分子量來選擇合適的內參，由於GAPDH的檢測分子量大約在36kD，因此該內參抗體不是很適合用於檢測30kD-40kD大小目標蛋白的WB實驗中。另外，不同的組織來源的樣本在選擇內參時還有一定的區別。比如某些細胞中，由於組織缺氧、糖尿病等因素會導致GAPDH的表達增高，不適合做內參。
一般來說，內參抗體可檢測的種屬類型越多，在使用過程中的選擇餘地就越大；而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩定性以及效價都要優於多克隆抗體。另外，抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面，也即相當於實際套用時的稀釋比率。一個效價高的100μlGAPDH抗體（假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000，最終使用液相當於500ml），要比效價低的1ml的GAPDH抗體（假如WB檢測的稀釋比率是1:200，最終使用液相當於2ml）性價比更高。因此在選擇抗體的時候，不但需要考慮抗體的量，還需要考慮抗體的效價，即不同套用的建議稀釋比率。
供應GAPDH抗體的進口品牌有很多，像Abcam、SantaCruz、CellSignaling（CST）、Millipore等都有相關GAPDH抗體提供。但是由於不是專門的標籤和內參抗體供應商，因此在性價比上不是最優的選擇，以Abcam為例，其一支100μlGAPDH抗體的RMB報價為￥4418；CST的一支100μlGAPDH抗體的報價是￥2997。
另外，一些國內的供貨商也能提供分裝的GAPDH抗體，但是在品牌和質量保障上都有不足。國產分裝的GAPDH體在質量穩定性上有不足，並且經過分裝以後，其效價也有損失。而原產於國內實驗室的GAPDH抗體有些具有較好的檢測活性，但是在套用類型上有差距，並且在批次之間的穩定性上較難控制，而國內僅有的少量原產抗體也是多克隆抗體。如果您想買到一支性價比更高，同時也是原裝進口品牌的GAPDH內參抗體，那Abbkine可能會是您的一個重要考慮選項之一。我們向您推薦Abbkine的GAPHD單克隆內參抗體Anti-GAPDHMonoclonalAntibody(2B5)（貨號A01020）