β-Actin

β-Actin

Actin即“肌動蛋白”,是細胞的一種重要骨架蛋白。同時Actin在細胞分泌、吞噬、移動、胞質流動和胞質分離等過程中起重要作用。Actin在不同物種之間高度保守,以至於很難獲得較好的針對actin的抗血清。Actin大致可分為六種,其中四種是不同肌肉組織特異性的,包括α-skeletal muscle actin,α-cardiac muscle actin,α-smooth muscle actin,和γ-smooth muscle actin; 其餘兩種廣泛分布於各種組織中,包括β-actin(β-non-muscle)和γ-non-muscle actin。不同的actin之間同源性大於90%,但在N-terminal同源性僅50%-60%,因此N-terminal常被用作actin的抗原。 β-Actin是橫紋肌肌纖維中的一種主要蛋白質成分,也是肌肉細絲及細胞骨架微絲的主要成分。具有收縮功能,分布廣泛。

β-Actin用途

β-Actin是PCR常用的內參,β-Actin抗體是Western Blot很好的內參指數。內參即是內部參照(Internal Control),對於哺乳動物細胞表達來說一般是指由管家基因編碼表達的蛋白。它們在各組織和細胞中的表達相對恆定,在檢測蛋白的表達水平變化時常用它來做參照物。常用的蛋白質內參有細胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin和GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)等。因此β-Actin抗體、β-Tubulin抗體以及GAPDH抗體成為最常見的三個動物細胞內參抗體。

β-Actin作為內參是得到了公認的,這是針對大多數組織和細胞來說的,它廣泛分布於細胞漿內,表達量非常豐富。Beta-actin由375個胺基酸組成,分子量大小為42-43kDa左右。

β-Actin β-Actin

β-actin的蛋白水平通常不會發生改變,因此被廣泛用於Western時上樣量是否一致的參照,也常被用於免疫染色觀察細胞的微絲結構。在用作Western的參照時,Actin抗體和Tubulin抗體的主要不同之處在於兩者所識別蛋白的分子量不同,這樣可以選擇合適的參照在同一塊膠同一張膜上實現同時檢測目標蛋白和參照蛋白。

套用學科

套用學科:生物化學與分子生物學(一級學科);胺基酸、多肽與蛋白質(二級學科) 定義2:真核細胞中含量豐富,構成肌動蛋白絲的一種蛋白質。以單體和多聚體兩種形式存在。 套用學科:細胞生物學(一級學科);細胞化學(二級學科)

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