鳥嘌呤核苷基

鳥嘌呤核苷基

新型鳥苷衍生物N2,N3-亞乙烯基鳥嘌呤核苷（εG），研究了它在不同pH下的紫外、螢光性質，分析了εG質子化、非質子化以及去質子化型體間的分布情況。εG的螢光性質決定於它的非質子化的型體，不同介質下螢光性質研究表明εG與水存在著氫鍵作用，進一步增強了它的螢光強度。利用其對牛血清白蛋白（BSA）的螢光猝滅作用，探討了二者之間的作用機理，測得其結合常數KB=3.891×103L/mol，結合位點數n＝1，並為εG作為螢光試劑提供了理論依據。

介紹

鳥嘌呤核苷基

亞乙烯基嘌呤核苷衍生物具有兩個咪唑環的三環獨特結構，不僅具有一定的生物活性，而且在螢光特性方面還具有量子產額高、螢光壽命長、發射螢光強度大，螢光波長處在可見區使螢光檢測不受蛋白質存在的干擾等特點[1]，因此在核酸、蛋白質、酶結構性質研究中作為螢光探針試劑引起人們廣泛的關注[2,3]。多年來，N1,N6-亞乙烯基腺嘌呤核苷及它的核苷酸衍生物的螢光性質前人已進行了深入研究，並在揭示酶機理和酶結構等生化性質方面發揮了重要作用[4-6]。但是，對鳥嘌呤三環結構核苷的螢光性質及生化性質的研究報導很少[7]。為此，我們以鳥苷為原料，按照我們以前報導的方法[8]，合成了角型三環鳥苷衍生物N2,N3-亞乙烯基鳥嘌呤核苷（εG），研究了它的紫外、螢光性質，考察了它與BSA的作用機理，測定了二者的結合位點數和結合常數，旨在進一步了解εG的生物活性及光譜性質，為其作為螢光探針試劑在蛋白質、核酸、酶的結構功能和藥理研究奠定理論基礎。
RF-530PC螢光分光光度計(日本島津)，UV-1601PC紫外可見分光光度計(日本島津)，T-85恆溫水浴槽，PXS-350型離子計。

鳥苷、三苯基膦（Ph3P）、偶氮二異丙基二甲酸酯（DIAD）、溴代乙醛縮二乙醇、10%Pd-C均為美國ALDRICH公司提供，純度為99%或以上；牛血清白蛋白(BSA)(上海生物化學製劑廠)；Tris（三羥基甲基氨基甲烷）、HCl、NaCl、乙腈、甲醇、氯仿皆為分析純；試驗用水為二次重蒸水。BSA溶液的濃度為6.52×10-6mol/L；Tris-HCl緩衝溶液的pH為7.4，濃度為0.25mol/L；N2,N3-亞乙烯基鳥嘌呤核苷（εG）的二甲亞碸溶液的濃度為2.29mmol/L，在0~4℃保存備用。溴乙醛由溴代乙醛縮二乙醇按文獻[9]製備。N2,N3-亞乙烯基鳥嘌呤核苷（εG）參考文獻[8]的方法合成製備。