金葡菌毒素注射液

【含量測定】蛋白質取本品，加水稀釋成每1ml中含蛋白180μg的溶液，作為供試品溶液，精密量取供試品溶液1.0ml，照福林酚測定法(附二)測定，從回歸方程中求出蛋白質含量。 類毒素取本品，分別加0.9％氯化鈉溶液稀釋6～15倍，作為供試品溶液，分別精密量取供試品溶液50μl，照類毒素含量測定法(附三)測定，溶血達＋＋＋的最大稀釋倍數，即為類毒素含量。 操作步驟在U形板各孔中加入0.9％氯化鈉溶液50μl，再在第一孔中各加抗毒血清50μl，倍量稀釋，每孔再加毒素(2單位/毫升)50μl，置37℃溫箱保溫30分鐘，加1％兔紅細胞懸液50μl，置37℃保溫60分鐘。

基本信息

• 中文名：金葡菌毒素注射液

金葡菌毒素注射液

拼音名：JinpujundusuZhusheye英文名：StaphjloToxoidInjection書頁號：D9-103標準編號：WS-10001-(HD-0822)-2002本品為金黃色葡萄球菌類毒素及其菌體經勻漿破碎提取精製而成的菌體蛋白混合而成的無菌水溶液。每1ml中含菌體蛋白250μg以上，含類毒素10單位以上。【性狀】本品為無色或淡黃色的澄明液體。【鑑別】(1)取本品2ml，加雙縮脲試劑(取硫酸銅0.75g和酒石酸鉀鈉0.3g，加水250ml使溶解，在攪拌下加入10％氫氧化鈉溶液150ml，加水至500ml)4ml，應顯紫紅色。(2)照活性測定項下方法試驗，應呈正反應。(3)照類毒素含量測定項下方法試驗，應呈正反應。【檢查】pH值應為6.0～7.5(中國藥典2000年版二部附錄ⅥH)。異常毒性取本品，依法檢查(中國藥典2000年版二部附錄ⅪC)，按皮下注射法給藥，應符合規定。活性測定升白細胞活性取本品照升白細胞活性測定法(附一)測定，環磷醯胺用量應能使白細胞下降至與正常對照組比較有顯著性差別(P＜0.05)，給藥後樣品組的白細胞數比環磷醯胺對照組有顯著性升高(P＜0.05)。其他應符合注射劑項下有關的各項規定(中國藥典2000年版二部附錄ⅠB)。【含量測定】蛋白質取本品，加水稀釋成每1ml中含蛋白180μg的溶液，作為供試品溶液，精密量取供試品溶液1.0ml，照福林酚測定法(附二)測定，從回歸方程中求出蛋白質含量。類毒素取本品，分別加0.9％氯化鈉溶液稀釋6～15倍，作為供試品溶液，分別精密量取供試品溶液50μl，照類毒素含量測定法(附三)測定，溶血達＋＋＋的最大稀釋倍數，即為類毒素含量。【類別】免疫調節藥。【規格】0.5ml:5單位(125μg)【貯藏】遮光，4～10℃保存【有效期】暫定2年曾用名：金葡菌素注射液附一升白細胞活性測定法試驗用動物昆明種小鼠，體重20～22g，雌雄各半。試劑環磷醯胺用配成1.0～2.0mg/ml。操作步驟試驗設空白對照組、環磷醯胺模型組和給藥組，每組小鼠10隻，雌雄各半，對照組不給任何藥物，模型組腹腔注射0.9％氯化鈉溶液，給藥組腹腔注射本品，劑量每1ml注射10ml，每天1次，連續5天。第3天開始，除正常對照組外，分別腹腔注射環磷醯胺0.2ml/10g體重，每天1次，連續3天。末次給藥1小時後，各鼠從眼眶靜脈採血20μl，用白細胞計數儀或普通顯微鏡計數各小鼠白細胞數。結果計算用t檢驗分析每組動物的白細胞數，結果應符合下列要求：(1)與空白對照組比較，模型對照組的白細胞下降，P值應小於0.05：(2)與模型對照組比較，試驗組白細胞數升高，P值應小於0.05。附二福林酚測定法試劑鹼性銅試液取氫氧化鈉10g，碳酸鈉50g，加水400ml使溶解，作為甲液；取酒石酸鉀0.5g，加水50ml使其溶解，另取硫酸銅0.25g，加水30ml使其溶解，將兩液混合作為乙液。臨用前，合併甲、乙兩液，並加水至500ml。操作法對照品溶液的製備取牛血清白蛋白對照品，加水製成每1ml中含0.3mg的溶液。供試品溶液的製備照各品種項下規定的方法製備。標準曲線的製備精密量取對照品溶液0.0ml、0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.7ml、0.9ml，分別置具塞試管中，各加水至1.0ml，再分別加入鹼性銅試液1.0ml，搖勻，各加入福林酚試液(取福林試液中的貯備液1→16)4.0ml，立即混勻，置55℃水浴中準確反應5分鐘，置冷水浴10分鐘，照分光光度法(中國藥典2000年版二部附錄ⅣB)，在650nm的波長測定吸收度；以0號管作為空白。以對照品溶液濃度與相應當吸收度計算回歸方程。測定法精密量取供試品溶液1.0ml，照標準曲線的製備項下的方法，自“加入鹼性銅試液”起，依法測定，從回歸方程計算多肽的含量，並乘以稀釋倍數，即得。附三類毒素含量測定法一、毒素單位測定法試驗材料1％兔血紅細胞懸液製備取體重1.7～2.5kg健康家兔，自耳靜脈採血2.0ml，加0.9％氯化鈉溶液8.0ml，搖勻，以每分鐘1500轉離心15分鐘，棄上清，重複兩次。配成1％紅細胞懸液，置4℃冰櫃保存(48小時後需重新配製)。操作步驟取U形板，向兩排的各孔中均加入0.9％氯化鈉溶液50μl，再向每排的第一孔中加入備測毒素50μl，以倍量稀釋至第十孔，然後分別向各孔中加入1％兔血紅細胞懸液50μl，置37℃溫箱保溫60分鐘，觀察結果。結果判定毒素引起溶血達＋＋＋的最大稀釋倍數，即為毒素單位，兩排的結果應相同。二、抗毒血清單位測定法抗毒血清製備取體重1.7～2.5kg健康家兔，自耳靜脈採血3.0ml，分離血清，測自然抗體小於1:8者為合格。選取合格的家兔，由後腿肌肉注射本品1ml，每隔3天注射一次，共注射5次，末次注射7天后從耳靜脈採血3.0ml，分離血清即得。操作步驟在U形板各孔中加入0.9％氯化鈉溶液50μl，再在第一孔中各加抗毒血清50μl，倍量稀釋，每孔再加毒素(2單位/毫升)50μl，置37℃溫箱保溫30分鐘，加1％兔紅細胞懸液50μl，置37℃保溫60分鐘。取出觀察，不溶血達＋＋時的最大稀釋度，即為抗毒素效價，效價達32以上者為合格，冰櫃中冷凍保存，供類毒素含量測定用。中和2單位毒素的抗毒血清為一個抗毒素單位。三、類毒素含量測定法操作步驟(1)取U形板，在兩排的各孔中分別加入經稀釋6～15倍的供試品溶液50μl；(2)分別向每排各孔中加入抗毒血清(2單位/毫升)50μl，置37℃溫箱保溫30分鐘；(3)於每孔中加入毒素(2單位/毫升)50μl，置37℃溫箱保溫30分鐘；(4)於每孔中加入1％兔血紅細胞懸液50μl，置37℃溫箱保溫60分鐘；(5)觀察結果，找出溶血達＋＋＋的最大稀釋倍數，即為類毒素含量。