膠質細胞生長因子

sfectam和pEGFP—N1-GGF2混合後轉染至實驗組大鼠胸段脊髓組織中;對照組大鼠只注射脂質體和空白質粒pEGFP—N1的混合物。 ①大鼠膠質細胞生氏因子2cDNA的克隆結果:成功克隆膠質細胞生長因子2cDNA。 ②重組質粒pEGFP-N1-GGF2的構建結果:酶切鑑定及測序分析證實成功構建膠質細胞生長因子真核表達載體pEGFP—N1-GGF2。

解釋

膠質細胞生長因子(GGF)是neuregulin基因的產物。GGF與erbB受體的異二聚體或同二聚體結合,催化多肽鏈中的酪氨酸磷酸化,激活下游信號分子而發揮其生理作用。GGF及其受體在發育及成熟神經系統中廣泛分布。GGF限定神經嵴細胞,使其向雪旺細胞分化,並在雪旺細胞發育過程中發揮重要作用,GGF能夠刺激少突膠質細胞前體細胞,少突膠質細胞和星形狀質細胞增殖,抑制少突膠質細胞前體細胞分化成少突膠質細胞,抑制O-2A細胞分化成星形膠質細胞,GGF能夠促進神經元沿著放射狀的膠質細胞遷移,促進培養的視網膜神經元存活的突觸生長。

詳細內容

【中國組織工程研究與臨床康復2005年卷】
膠質細胞生長因子真核表達載體的構建及其在脊髓內的表達魏梅洋[1]董艷[2]李家順[1]賈連順[1]薛亞軍[2]韓晞[2]摘要:目的:構建膠質細胞生長因子2真核表達載體pEGFP—N1-GGF2,觀察其在大鼠脊髓內的表達。方法:實驗於2004—01/10在解放軍第二軍醫大學長征醫院神經外科實驗室完成。出生1周SD大鼠2隻和體質量250~300g雄性成年SD大鼠12隻。將成年大鼠分為對照組和實驗組,每組6隻。①採用反轉錄聚合酶鏈反應方法從大鼠胎腦組織總RNA中擴增出膠質細胞生長因子2的全序列cDNA。②以融合蛋白方式克隆到增強型綠色螢光蛋白報告基因的真核表達載體pEGFP-N1中,構建重組質粒pEGFP-N1-GGF2。③採用基因注射法將陽離子脂質體Transfectam和pEGFP—N1-GGF2混合後轉染至實驗組大鼠胸段脊髓組織中;對照組大鼠只注射脂質體和空白質粒pEGFP—N1的混合物。基因注射後1周,兩組各取3隻大鼠麻醉後取材行反轉錄聚合酶鏈反應,另取3隻大鼠麻醉後取出T8,T9脊髓,冰凍切片後行螢光照相,觀察綠色螢光蛋白表達情況。結果:12隻大鼠均進入結果分析。①大鼠膠質細胞生氏因子2cDNA的克隆結果:成功克隆膠質細胞生長因子2cDNA。②重組質粒pEGFP-N1-GGF2的構建結果:酶切鑑定及測序分析證實成功構建膠質細胞生長因子真核表達載體pEGFP—N1-GGF2。(固反轉錄聚合酶鏈反應證明膠質細胞生長因子mRNA表達:實驗組基因轉染1周后局部脊髓內膠質細胞生長因子2mRNA的表達顯著增加。④pEGFP—N1-GGF2基因體內轉染結果:實驗組注射局部脊髓內灰質和白質神經細胞內均有較多綠色螢光蛋白表達;而對照組未見螢光蛋白表達

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