膠原纖維是三種纖維中分布最廣泛，含量最多的一種纖維。廣泛分布於各臟器內。在皮膚、鞏膜和肌腱最為豐富。膠原纖維染色主要用於和肌纖維的鑑別。
介紹
膠原纖維（collagenous fiber）膠原纖維在疏鬆結締組織中排列成束，彼此交織吻合，纖維束常有分支。纖維具有韌性，抗牽引力強。電鏡觀察，膠原纖維由更細的微原纖維（microfibrils）組成。微原纖維有特殊的橫帶，其周期為64nm。每條微原纖維有一序列的明暗帶。暗帶中比明帶有較多游離的化學根，所以貯留較多的電鏡切片染色劑
膠原纖維主要含有膠原蛋白，胺基酸有甘氨酸、脯氨和羥脯氨酸等。膠原是唯一含羥脯氨酸較多的蛋白質，因此，測定羥脯氨酸的量能確定組織中膠原的含量。膠原蛋白占全身蛋白質的30％。聚合成膠原的微原纖維的蛋白質分子稱為原膠原分子。
苦味酸—酸性品紅法
試劑配製：
Weigert氏鐵蘇木素液
兩液需分瓶盛放，A液配製後數天即可用，不宜配製過多，如保存時間過長則染色不良。平時應密封保存，B液配製後立即可用。臨用前將A、B兩液等量混合。
VanGieson氏染液
A液：1％酸性品紅水溶液
B液：苦味酸飽和水溶液(約1.2％)A、B兩液分瓶盛放。臨用前取A液1份，B液9份混合後使用。
操作方法：
1.組織固定於10％甲醛液，常規脫水包埋。
2．切片脫蠟至水。
3．用Weigert氏鐵蘇木素液染5～10分鐘。
4.流水稍洗。
5．1％鹽酸酒精迅速分化。
6.流水沖洗數分鐘。
7．用VanGieson氏液染1～2分鐘。
8．傾去染液，直接用95％酒精分化和脫水（可放入溫箱烤乾後，直接透明封片）。
9.無水酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固
結果膠原纖維呈鮮紅色，肌纖維，胞質及紅細胞黃色，胞核藍褐色。
（二）、Masson三色染色法
麗春紅酸性品紅液：麗春紅0.7g，酸性品紅0.3g，蒸餾水99ml，冰醋酸1ml苯胺藍液:苯胺藍2g，蒸餾水98ml，醋酸2ml亮綠液：亮綠0.2g，蒸餾水100ml，冰醋酸0.2ml染色步驟：1.切片脫蠟至蒸餾水2.蘇木素染5～10分鐘3.鹽酸酒精分化4.流水藍化，蒸餾水洗(蘇木素可不染)5.麗春紅酸性品紅液中染5～8分鐘6.蒸餾水洗7.1%磷鉬酸中染1～3分鐘8.不用水洗直接入苯胺藍液或亮綠液5分鐘(如染色效果不佳,可在冰醋酸內脫色後重染)9.水速洗，置60℃溫箱中烘乾，二甲苯透明,封固結果:膠原纖維藍色（苯胺藍復染）或綠色（亮綠復染）,肌纖維、纖維素紅色。
注意事項：
1．組織用Bouin氏液固定為佳。。2．用l％磷鉬酸處理時可在鏡下控制，見肌纖維呈紅色，膠原纖維呈淡紅色即可。
參考文獻：
2、凌啟波《實用病理特殊染色和組化技》
3、劉介眉等《病理組織染色的理論方法和套用》
