Cell Counting Kit-8

Cell Counting Kit-8

Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒或者CCK8試劑盒,是MTT法的替代方法。CCK8也是一種基於WST-8而廣泛套用於細胞活性和細胞毒性檢測的快速、高靈敏度試劑盒。

概述

CCK8屬於MTT的升級產品,該試劑可用於簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】。它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物(Formazandye)。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。

與WST-8的關聯

CCK8試劑盒是基於WST-8而套用的。WST-8是MTT的一種升級替代產品,和MTT或其
cck8驗證圖cck8驗證圖
它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優點。首先,MTT被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-8和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的,可以省去後續的溶解步驟。其次,WST-8產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加穩定,使實驗結果更加穩定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比線性範圍更寬,靈敏度更高。

檢測方法對比

酚紅血清對CCK8法的檢測不會造成干擾。細胞毒性非常低,加入WST-8顯色後,可以在不同時間反覆用酶標儀讀數從而找到最佳測定時間。
細胞計數方法​ MTT法​ ​XTT法 WST-1法​ CCK8法​
​ 形成的formazan水溶性 ​差 ​好 ​好 ​好
​產品性狀 ​粉末 ​2瓶溶液 ​溶液 ​1瓶溶液
​使用方法 配成溶液後使用​ ​現配現用 ​無需預製 ​無需預製
​檢測靈敏度 ​高 ​很高 ​很高 ​高
​檢測時間 ​較長 ​較短 ​較短 ​最短
​檢測波長 ​560-600nm ​420-480nm ​420-480nm ​430-490nm
​細胞毒性 ​高,細胞形態完全消失 ​很低,細胞形態不變 ​很低,細胞形態不變 ​很低,細胞形態不變
​試劑穩定性 ​一般 ​較差 ​一般 ​很好
​大批量樣品檢測 ​可以 ​非常適合 ​非常適合 ​非常適合
便捷程度
一般
便捷
便捷
非常便捷

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