河南省乳品工程技術研究中心中心介紹
1、研究開發方向、目標和主要任務
河南省乳品工程技術研究中心集技術與產品的研究、開發、決策、交流、服務為一體。中心瞄準國際乳業範圍的研究進展，積極開展乳業相關科學研究。目標：將乳品中心建設成為河南乳業的科技創新中心、乳品專業檢測中心、乳業信息中心和乳業培訓中心多項職能於一體的綜合性產業平台。中心的主要任務對應有：功能性和高附加值新產品的研究、新技術和新工藝的研究推廣、科技成果的轉化與產業化；利用高新技術和新興科技開展對乳品中相關的檢測項目和檢測方法進行研究、乳品安全質量監測體系套用研究；乳品標準化研究、建設乳業交流和共享的信息資源平台；人才培養以及對外技術交流與合作。
2、工程技術開發能力、水平和特點
在技術創新與研究方面，依託單位河南三鹿花花牛乳業有限公司以奶業為主不斷加大科研投入力度，近3年，科研投入已占公司銷售收入的1.5%。公司研究取得的"奶牛集約化現代化生產系統的研究"和"保鮮乳生產工藝技術研究"等成果，先後榮獲河南省科技進步二等獎和省科技進步三等獎多項。協作單位河南農業大學在基礎研究和專業培訓方面有著很強的優勢，河南農科院依託國家級的農產品檢測中心可以對乳業相關項目進行檢測，而牧專在乳品科研和套用研究方面亦有較強的實力，花花牛作為河南乳業的龍頭企業在中試和產業化方面有極強的示範和帶動作用。中心的組成，涵蓋了乳業基礎研究、套用研究到中試及產業化整個完整產業鏈，是產學研結合的極佳模式，完全能夠起到和發揮其應有的作用。
3、技術成果轉化情況
目前已經有《紫花苜蓿高產栽培技術及草品產業化開發》、《牛磺酸金屬元素螯合物的研製》和《優質功能性發酵乳中試轉化》三項成果進入轉化階段。
4、承擔國家和省級項目情況
高騰雲教授主持的"奶牛規模化健康養殖技術研究與示範"（農業部）；王艷玲主持的"奶牛集約化飼養工程技術及乳業高新技術產業化的研究"（河南傑出人才創新基金）；楊國宇主持的"酪蛋白源性生物活性肽生產技術研究"；吳祖興"河南省奶製品精深加工關鍵技術及產業化技術套用研究"（河南省重大科技攻關課題）；寧長申"防治人畜隱孢子蟲病的高免牛乳研製"；李文獻主持的"優質功能性發酵乳工藝技術研究"等多項科研項目。
5、內部機構設定情況
中心實行主任負責制，河南三鹿花花牛乳業有限公司總經理李文獻任中心主任，公司技術部經理王少武任常務副主任。中心聘請中國農業大學博士生導師南慶賢教授擔任學術委員會主任；湖南大學博士生導師曾德明教授擔任行銷管理顧問；荷蘭專家漢克先生擔任奶牛技術顧問。工程中心實行契約制，把中心任務分解設定為各項課題，任務落實到人，在中心管委會和組織部門指導下，按科技廳要求和《河南省工程中心管理辦法》的相關管理規定積極開展工作和組織實施，並層層簽訂目標責任書。
實行產、學、研結合的運行機制，根據我省乳業發展的重大關鍵性、基礎性和共性技術問題，按照"有所為，有所不為"的原則，選擇重點領域優先發展，以需求為導向，面向生產、著眼套用，立足解決行業內重大實際問題，通過最佳化重組、系統集成，促進產、學、研多種形式結合，包括建立產學研信息快速傳遞反饋機制、產學研一體化研究與開發和人才培養機制。與河南農業大學、鄭州牧業工程高等專科學校、河南省農科院等高等院校和科研機構建立良好的合作關係，並繼續與奧地利蒂羅爾奶業公司保持著良好的合作關係，積極吸收洛陽巨爾、商丘科迪等河南各兄弟乳品企業的優秀技術成果，集中我省優勢乳業資源，使工程技術研究中心真正成為河南乳業的技術集散地和輻射中心，成為推進我省乳業快速發展的信息中心和培養高級乳業技術和管理人才的搖籃。
河南省乳品工程技術研究中心科技項目
三聚氰胺檢測方法匯總
GC-MS法測定動物食品中的三聚氰胺
Spectra-Quad實現三聚氰胺含量線上檢測
超高效液相色譜_電噴霧串聯質譜法測定飼料中殘留的三聚氰胺
反相高效液相色譜法測定飼料中三聚氰胺的含量
高效液相色譜-二極體陣列法測定高蛋白食品中的三聚氰胺
高效液相色譜法(HPLC)測定飼料中三聚氰胺的含量
高效液相色譜-四極桿質譜聯用測定飼料中三聚氰胺含量
固相萃取與高效液相色譜聯用測定寵物食品中三聚氰胺
液相色譜串聯質譜法(LC-MSMS）分析寵物食品中三聚氰胺
液相色譜-串聯質譜法測定飼料中三聚氰胺殘留
GC-MS法測定動物食品中的三聚氰胺
2.1儀器與條件
Agilent1100高效液相色譜儀（美國，Agilent公司）；二極體陣列檢測器（DAD），檢測波長240nm，柱溫：40℃。
（1）AgelaVenusilTMASBC18（4.6×250mm）；緩衝液：10mM檸檬酸,10mM庚烷磺酸鈉；流動相：緩衝溶液:乙腈=85:15；流速：1.0mL/min。
（2）AgelaVenusilTMASBC8（4.6×250mm）；流動相：緩衝液：乙腈=85：15；緩衝液：10mM檸檬酸，10mM辛烷磺酸鈉，調pH為3.0；流速：1.0mL/min；
離子交換固相萃取柱AgelaClearnertTMPCX(北京艾傑爾科技有限公司)
2.2試劑與樣品
寵物飼料樣品（農業部飼料供應中心提供）；甲醇、乙腈為北京艾傑爾科技有限公司提供；氨水、乙酸鉛、三氯乙酸、均購於北京化學試劑公司；三聚氰胺標準品、檸檬酸、辛烷磺酸鈉（Sigma公司）；甲醇為色譜純，其他均為化學純。
3實驗方法
3.1樣品前處理方法
(1)標準樣品配製：
取50mg三聚氰胺標準品，以20%甲醇溶解定容至50mL得到1000ppm的標準溶液，使用時，以提取液(0.1%三氯乙酸)稀釋至所要的濃度。
(2)提取：
稱取飼料樣品5g，加入50ml0.1%三氯乙酸提取液，充分混勻，加入2mL2%乙酸鉛溶液，超聲20min。
然後取部分溶液轉移至10mL離心管中，8000rpm/min離心10min，取上清液3mL過混合型陽離子交換小柱(PCX)。
(3)淨化(PCX小柱，60mg/3mL)：
a)活化及平衡：3mL甲醇，3mL水
b)上樣：加入提取液3mL
c)淋洗：3mL水；3mL甲醇；棄去淋洗液並將小柱抽乾。
d)洗脫：5mL5%氨化甲醇(v/v)洗脫。(5%氨化甲醇的配製：5mL氨水+95mL甲醇)。
e)濃縮：50℃，氮氣吹乾，20%甲醇/水定容至2mL，HPLC分析或衍生後GC/MS分析。
3.2HPLC檢測方法
3.2.1三聚氰胺HPLC-UV檢測方法
三聚氰胺是強極性化合物，在傳統的反相C18柱上保留很差，需要用離子對試劑色譜方法才能有良好的保留與分離，按照美國食品藥品監督管理局（FDA）的三聚氰胺檢測方法和中國農業部公布的三聚氰胺檢測方法，採用艾傑爾(Agela)ASB系列親水色譜柱，可以得到良好的分離效果，分析色譜圖如下：
圖2VenusilASB色譜柱分離三聚氰胺的譜圖
(a)色譜柱：VenusilASBC84.6×250mm；標準：FDA方法；流動相：緩衝液：乙腈=85：15；緩衝液：10mM檸檬酸，10mM辛烷磺酸鈉，調pH為3.0；流速：1.0mL/min；柱溫：40oC；波長：240nm
(b)色譜柱：VenusilASB-C184.6×250mm；標準：中國農業部頒標準方法；緩衝液：10mM檸檬酸,10mM庚烷磺酸鈉；流動相：緩衝溶液:乙腈=85:15；流速：1.0mL/min;柱溫：40℃；波長：240nm
空白加水平（mg/L）回收率0.01116%0.1108%0.592%296%
3.2.2三聚氰胺LC-MS檢測方法
由於FDA公布的HPLC-UV方法中，流動相添加了離子對試劑，因此限制了液質聯用方法的使用；但不用離子對試劑色譜方法，三聚氰胺在傳統的C18柱上保留很差，不能得到較好的分離定量〔3〕。
基於此問題，艾傑爾科技公司自主開發了新的方法，採用艾傑爾(Agela)ASB系列親水色譜柱，不用離子對試劑也能得到有效的保留與分離。因此方法中流動相不含離子對試劑，可以用於質譜檢測。
與FDA2007年4月公布的《UpdatedFCCDevelopmentalMelamineQuantitation(HPLC-UV)》相比較，該方法大大降低了最低檢測限（MSD：0.5ppm；UV：2ppm），提高了檢測靈敏度。
以該方法分別在ASB-C84.6×250mmASB-C184.6×250mm得到的譜圖如下：
圖3LC-MS方法檢測三聚氰胺的譜圖
緩衝液：10mM的NH4AC；
流動相：Buffer:：ACN=95：5；流速：1.0mL/min；進樣量：樣品先用70%ACN溶解成約1mg/mL，用ACN稀釋成0.1mg/mL，進10uL；柱溫：40℃；波長：240nm
4結果與討論
4.1陽離子交換柱(PCX)
三聚氰胺呈弱鹼性(弱陽離子化合物)，淨化過程一般應選擇陽離子交換柱。混合型的陽離子交換柱(PCX)通過將磺酸基團(-SO3H)鍵合在極性高聚物聚苯乙烯/二乙烯苯（PEP）吸附劑上，具有陽離子交換和反相吸附兩種機理，並具有以下優點：
a)可通過兩種不同溶液的洗滌(水/一定pH值的緩衝溶液和有機溶劑)，使樣品更乾淨，提高檢測的靈敏度。
b)批次重複性好。
c)回收率高，重現性好，即使小柱跑乾也可以得到較高回收率。
4.2LC-MS方法優點：
（1）檢測過程簡便：無須添加離子對試劑，三聚氰胺就可得到良好的保留與分離，避免了配製離子對流動相的複雜過程。
（2）提高了檢測的靈敏度：無離子對試劑，可以用於質譜檢測器，大大降低了最低檢測限（MSD：0.5ppm；UV：2ppm）。
（3）降低了檢測成本：不用離子對試劑，就不再需要買價格較貴的離子對試劑了，從而降低了檢測成本。
（4）延長了色譜柱的使用壽命：避免了使用離子對試劑減少色譜柱壽命的影響。
（5）該方法所使用的色譜柱具有通用性：無論是用FDA方法、中國農業部部頒標準方法和本公司開發的LC-MS方法，使用艾傑爾(Agela)ASB系列親水色譜柱均能得到一個很好的檢測結果，從而給客戶提供了多種選擇空間。
國家食品質量監督檢測中心有關人士說，在現有的國家標準奶粉檢測中，主要進行蛋白質、脂肪、細菌等檢測。三聚氰胺屬於化工原料，是不允許添加到食品中的，所以現有標準不會包含相應內容。也就是說，三聚氰胺不屬於常規檢測項目，正常情況下，很少有人會想到去檢測它。
