克隆載體
克隆載體（Cloning Vector）：通常採用從病毒、質粒或高等生物細胞中獲取的DNA作為克隆載體，在載體上插入合適大小的外源DNA片段，並注意不能破壞載體的自我複製性質。將重組後的載體引入到宿主細胞中，並在宿主細胞中大量繁殖。
質粒是染色體外自主複製的遺傳因子，多為閉環DNA分子，天然存在於細菌、真菌細胞內，質粒可以自發地從一個細菌遷移進入另一個細菌。宿主細胞指的是目的基因進行克隆的細胞，例如人的生長激素基因導入大腸桿菌進行克隆，大腸桿菌細胞就是生長激素基因的宿主細胞。如果目的基因的宿主是細菌或真菌，通常用質粒做目的基因的載體，特殊情況下用噬菌體做載體；如果宿主細胞是動植物，載體通常選取病毒或染色體DNA構建。我們把經過改造完成的能運送目的基因的載體稱為克隆載體。
作為克隆載體最基本的要求是：①具有自主複製能力，否則目的基因就無法進行克隆；②攜帶易於篩選的選擇標記，用於篩選成功的重組DNA，淘汰未重組的空載體；③載體應儘可能小，便於導入細胞和進行繁殖；④使用安全。
迄今為止，已經通過天然質粒、病毒等構建了多種克隆載體，例如1977年Boliver等從天然質粒出發，經刪除、融合、轉座及重排等操作，構建成功了適合多種用途至今仍廣泛使用的克隆載體pBR322，它全長4361bp，含兩個抗性基因，用於重組後的篩選，具有天然質粒的複製起始點（圖8-1-3）。如果目的基因較大，需要構建病毒克隆載體，常見的是λ噬菌體克隆載體。
