雙縮脲試劑

雙縮脲試劑

化學物質:雙縮脲試劑(biuret reagent)是由雙縮脲試劑A(NaOH)和雙縮脲試劑B(CuSO4)兩種試劑組成。用於驗證蛋白質的存在雙縮脲試劑A的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.1 g/mL的水溶液;雙縮脲試劑B的成分是硫酸銅的質量分數為0.01 g/mL的水溶液。製備0.1 g/mL的氫氧化鈉水溶液和0.01 g/mL的硫酸銅水溶液,現配現用。

基本信息

解釋

雙縮脲試劑是由雙縮脲試劑A雙縮脲試劑B兩種試劑組成.
雙縮脲試劑A的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.1 g/mL的水溶液
雙縮脲試劑雙縮脲試劑

雙縮脲試劑B的成分是硫酸銅的質量分數為0.01 g/mL的水溶液。
雙縮脲試劑可以驗證蛋白質的存在。

具體方法是

先將雙縮脲試劑A加入組織樣液,搖盪均勻,在加入雙縮脲試劑B,搖盪均勻。如果組織里含有蛋白質,那么會看到溶液變成紫色

套用

雙縮脲(NH3CONHCONH3)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出一個分子氨後得到的產物。在強鹼性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物,稱為雙縮脲反應。凡具有兩個醯胺基或兩個直接連線的肽鍵,或能過一個中間碳原子相連的肽鍵,這類化合物都有雙縮脲反應。
H2O
O=CC=O

雙縮脲試劑雙縮脲試劑
HNNH
R-CHCH-R
O=CCuC=O
HNNH
R-CHCH-R
H2O
試劑作用
雙縮脲試劑可以驗證蛋白質的存在。
具體方法是:
先將雙縮脲試劑A加入組織樣液,振盪均勻(必須營造鹼性環境),再加入雙縮脲試劑B,振盪均勻。如果組織里含有蛋白質,那么會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與Cu2+絡合成紫紅色的絡合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。
雙縮脲(NH2CONHCONH2)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出一個分子氨後得到的產物。
雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,因蛋白質中也有-CONH-基也可用於檢驗蛋白質,與蛋白質接觸後的顏色呈紫色。

注意事項

在使用雙縮脲試劑時候,必須注意,必須是先加0.1g/mL氫氧化鈉溶液,再加0.01g/mL硫酸

雙縮脲試劑雙縮脲試劑
銅的水溶液。(若先加入硫酸銅[CuSO4]溶液,再加入氫氧化鈉[NaOH]溶液,則無法充分製造鹼性環境,此時CuSO4會與NaOH發生複分解反應,生成藍色氫氧化銅[Cu(OH)2]沉澱,導致現象不清,無法較好地達到實驗目的.

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