血紅蛋白電泳

血紅蛋白電泳

血紅蛋白電泳珠蛋白生成障礙性貧血是世界上最常見和發病率最高的一種單基因遺傳病,常見有兩類,即α和β海洋性貧血(以往稱地中海貧血),是由於基因突變引起存在於紅細胞內的幾種血紅蛋白(Hb)合成異常。此項化驗可用於檢驗異常Hb,進一步診斷一些相關疾病。

簡介

正常範圍

血紅蛋白A 95%

血紅蛋白A2 1.6%~3.5%

血紅蛋白F 0.2%~2.0%

檢查介紹

各種血紅蛋白的等電點不同的特點,在一定pH緩衝液中所帶的正、負電荷不同,經電泳後各血紅蛋白的移動方向不同。

臨床意義

該試驗是為了確診是否有異常血紅蛋白存在,以及各種血紅蛋白的比例。

臨床意義

一、HbA2升高,可見於維生素B12或葉酸缺乏所致的巨細胞貧血、部分輕型珠蛋白生成障礙性貧血;

二、HbA2降低:見於缺鐵性貧血;

三、HbF升高:可見於純合子β珠蛋白生成障礙性貧血、雜合子β珠蛋白生成障礙性貧血和正常新生兒。

四、其他:

1.主要成分為HbS,而無HbB,可見於鐮形細胞血紅蛋白病;

2.HbS、HbF和HbA2輕度增加,而HbA極少或消失,結合調查可診斷為HbS-β-海洋性貧血,多見於地中海地區。

3.除HbS外,含有10%-30%HbA和輕度增高的HbF及HbA2,也可考慮HbS-β-海洋性貧血;

4.HbS占20%-30%,HbA占65%-75%,並含有正常的HbF和HbA2,可診斷為HbS-α-海洋性貧血;

5.HbA消失,HbC占總血紅蛋白的28%-44%,可診斷為血紅蛋白病,多見於黑人,血片中可見較多的靶形細胞;

6.有HbS,還出現HbD,血片中有靶形細胞,可診斷為血紅蛋白D病,我國北方較多見;

7.電泳結果出現HbE,可診斷為血紅蛋白E病,主要見於東南亞、印度等,我國以廣東南部多見。

注意事項

蠟酸纖維薄膜電泳直接比色法

試劑:同醋酸纖維素膜微量血紅蛋白電泳。

操作:

(1)將醋酸纖維素膜作1/3切開(4cm×8cm)漫於TEB緩衝液中,10min以上。

(2)取出醋酸纖維素膜用濾紙吸去多餘的水份。以Hb吸管吸取100g/L溶血液10μl均勻塗於玻璃推片下緣,在距薄膜陰極端1.5~2.0cm處於無光澤麵點樣。每個標本同時做兩份。

(3)電泳:緩衝液同微量血紅蛋白電泳。電壓180V,時間40min~1h。(以各區帶明顯分開為宣)電泳後交換電極,緩衝液可反覆使用。

血紅蛋白電泳計算血紅蛋白電泳計算

(4)洗脫與定量 分別剪下HbA,HbA2和相當於HbA2大小的對照區帶。如有異常Hb區帶(HbX)也同時剪下,各自放在相應的試管中。於HbA管中加TEB緩衝液10ml,其餘各管加TEB緩衝液2ml,浸泡30min,時時振搖。待完全洗脫後。將洗脫液混勻,用721分光光度計,波長413nm。以空白調零,測各管吸光度。

(5)計算(如右圖):

如有異常HbX,則計算HbA2%時,分母中還要加:HbX吸光度。

臨床血液學檢測

血液一般檢測包括血液細胞成分的常規檢查、網織紅細胞檢測和紅細胞沉降率檢測。近年來由於血液學分析儀的廣泛套用,血液常規檢測的項目日益增多。本任務是關於臨床血液學檢測的相關詞條。

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