鏈霉親和素

鏈霉親和素

鏈霉親和素(streptavidin下稱SA)是與親和素(avidin下稱AV)有相似生物學特性的一種蛋白質,是streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及結合生物素的能力與雞蛋清中的親和素相似,等電點6.0,非特異性結合遠比親和素低。

來源

SA 是Streptomyces avicllrdi菌培養過程中的分泌產物,主要通過2一亞氨基生物素親和層析法提純,1L培養液中含蛋白10~60mg 。

分子量

鏈霉親和素是四聚體蛋白,大小為66KDa。一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結合,兩者之間的親和力極為強烈,鏈霉親和素-生物素複合物的解離常數處於 10 mol/L 數量級 ,這一性質常用於分子生物學用途。其中一條完整的SA肽鏈中有159個胺基酸殘基,分子量為16450。

比消光係數

消光係數與蛋白中Tyr含量有關, 由於SA 中Tyr的含量比AV 多,所以SA的比消光係數也較AV 為高,兩者分別為E 1mg/mL=3.40和E1mg/mL=1.57。在282nm 上這兩種蛋白結合生物素後並不改變其消光係數,而在233nm上,它們結合生物素後郡便其消光係數值增高,現在一般都是利用蛋白的這種吸光特點來測定它們的活性。

組成

鏈霉親和素分子由4條相同的肽鏈組成,其胺基酸組成中,甘氨酸和丙氨酸的含量較大,而且結合生物素的活性基團也是肽鏈中的色氨酸殘基;鏈霉親和素是一種稍偏酸性(pH6.0)的蛋白質,並且不帶任何糖基。在蛋白水解酶作用下,鏈霉親和素可在N端10~12和C端19-21間斷裂,形成的核心鏈霉親和素仍然保持完整的結合生物素的能力。鏈霉親和素的活性單位也是以結合1μg生物素所需的量來表示,1mg鏈霉親和素的最高活性可達18U。

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