真養產鹼桿菌

Alcaligen 〔9〕Biotechn .Biotechn

拉丁名

Alcaligenes eutrophus

形態特徵

【待完善】

經濟用途

隨著上世紀塑膠工業的發展,人們的衣食住行已直接或間接地和塑膠聯繫在一起了,塑膠為人類的發展作出了巨大貢獻。但是,由於塑膠的不可降解性,其給人類生存環境帶來的危害也越來越大。為解決這一問題,國內外科學家相繼開展了生物可降解塑膠的研究與開發。
利用微生物生產的生物降解塑膠:聚-β-羥基丁酸(Poly-β-hydroxybutyrate,PHB)、聚-β-羥基丁酸-co-β-羥基戊酸共聚物(Poly-β-hydroxybutyrate-co-β-hydroxyvalerate,PHBV)成了這類研究中的一個熱門。研究表明,PHB、PHBV具有很好的熱可塑性,其抗衝擊強度,延展性和熱穩定性均可和化學塑膠相媲美,甚至更優。PHB、PHBV是細菌細胞內的儲存物質,它作為細胞內碳源和能量參與細胞的物質代謝。PHB、PHBV被微生物徹底分解後,其最終產物是二氧化碳和水,對環境無任何危害。
研究表明,真養產鹼桿菌(Alcaligenes eutrophus)是一種優良的積累PHB、PHBV的細菌。因而真養產鹼桿菌被套用於發酵法生產PHB、PHBV

培養方法、分析方法

1.1 培養基和培養方式
1)基礎培養基(g/L) 果糖20g(單獨滅菌);磷酸氫二鈉4g;硫酸鎂0.4g;硫酸銨1.5g;磷酸二氫鉀1.3g;微量元素溶液1ml/L;蒸餾水1L;pH7.0;115℃滅菌20min。
2)微量元素溶液(g/L) FeSO4·7H2O 10g;ZnSO4·7H2O 2.25g;CuSO4·5H2O 1g;MnSO4·5H2O 0.5g;CaCl2·2H2O 2g;Na2B4O4·10H2O 0.23g;(NH4)6Mo7O24 0.1g;35%HCl 10ml。
3)斜面培養基(g/L) 酵母浸膏10g;蛋白腖10g;牛肉膏5g;氯化鈉3g;瓊脂20g;蒸餾水1000ml,pH7.0,115℃滅菌20min。
4)選擇培養基(g/L) 葡萄糖10g;(NH4)2SO4 0.75g;Na2HPO4·12H2O 2g;KH2PO4 0.65g;MgSO4 0.2g;微量元素溶液0.5ml;蒸餾水1000ml;pH7.0;115℃滅菌20min。
5)斜面培養 恆溫培養箱中,30℃,培養48h。用於菌種傳代及保藏。
6)搖瓶培養 250ml三角瓶,裝入20ml培養基,接種後置鏇轉式搖床上,200r/min,30℃,振盪培養48h。
7)平皿培養 直徑9cm的平皿,裝入20ml選擇培養基,恆溫培養箱中,30℃,培養48h。用於突變株的篩選。
1.2 分析方法
1)生長量 (1)菌體濃度:將發酵液適當稀釋後,於620nm處測O.D值。(2)菌體乾重:取發酵液10ml,離心收集菌體,經水洗2次後,於80℃乾燥至恆重後稱重。
2)氨態氮的測定 甲醛法。
3)還原糖的測定 3,5-二硝基水楊酸法。
4)PHB的測定 (1)氣相色譜法。(2)硫酸色譜法。

參考文獻

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