構造
目鏡測微尺
是一塊圓形玻片，其中央刻有精確的刻度，通常是將5mm劃分為50格，實際每格等於100μm。刻度的大小隨著使用的目鏡和物鏡的放大倍數而改變,用前必須用物鏡測微尺來標定。
物鏡測微尺
物鏡測微尺為一塊特製的載玻片，其中央有一小圓圈。圓圈內刻有分度，將長1mm的直線等分為100小格，每小格等於10μm。
標定
取下接目鏡，旋下目鏡上的目透鏡，將目鏡測微尺放入接目鏡的中隔板上，使有刻度一面朝下，再旋上目透鏡，並裝入鏡筒內。
將物鏡測微尺置於顯微鏡的載物台上，使有刻度的一面朝上，同觀察標本一樣，使具有刻度的小圓圈位於視野中央。
先用低倍鏡觀察，對準焦距，待看清物鏡測微尺的刻度後，轉動目鏡，使目鏡測微尺的刻度與物鏡測微尺的刻度相平行，並使兩尺的左邊第一條線相重合，再向右尋找兩尺的另外一條重合線。
記錄二條重合線間的目鏡測微尺的格數和物鏡測微尺的格數。
1.取下接目鏡，旋下目鏡上的目透鏡，將目鏡測微尺放入接目鏡的中隔板上，使有刻度一面朝下，再旋上目透鏡，並裝入鏡筒內。
2.將物鏡測微尺置於顯微鏡的載物台上，使有刻度的一面朝上，同觀察標本一樣，使具有刻度的小圓圈位於視野中央。
3.先用低倍鏡觀察，對準焦距，待看清物鏡測微尺的刻度後，轉動目鏡，使目鏡測微尺的刻度與物鏡測微尺的刻度相平行，並使兩尺的左邊第一條線相重合，再向右尋找兩尺的另外一條重合線。
4.記錄二條重合線間的目鏡測微尺的格數和物鏡測微尺的格數。
計算方式
目鏡測微尺每格長度=兩個重疊刻度間物鏡測微尺格數×10/兩個重疊刻度間目鏡測微尺格數。
以同樣方法，分別在不同倍率的物鏡下測定測微尺上每格的實際長度。
如此測定後的目鏡測微尺的尺度，僅適用於測定時所用的顯微鏡的目鏡和物鏡的放大倍數，若更換物鏡，目鏡的放大倍數時，必須再進行校正標定。
1.目鏡測微尺每格長度=兩個重疊刻度間物鏡測微尺格數×10/兩個重疊刻度間目鏡測微尺格數。
2.以同樣方法，分別在不同倍率的物鏡下測定測微尺上每格的實際長度。
3.如此測定後的目鏡測微尺的尺度，僅適用於測定時所用的顯微鏡的目鏡和物鏡的放大倍數，若更換物鏡，目鏡的放大倍數時，必須再進行校正標定。
