QPCR

QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時螢光定量核酸擴增檢測系統，也叫實時定量基因擴增螢光檢測系統，簡稱QPCR。

基本信息

• 中文名：QPCR
• 其他外文名：Real-time Quantitative PCR Detecting System

• 又名：實時定量基因擴增螢光檢測系統
• 特點：所用儀器少，只用一台儀器等

關係

QPCR

聚合酶鏈式反應（PolymeraseChainReaction簡稱PCR）原理憑藉敏感、特異、快速的特點榮獲93年諾貝爾化學獎。因其在病原體檢測方面的獨特優勢，因而已開發國家在相關方法和儀器方面的研發非常快，成為分子生物學診斷的主流，至今仍處於學術和套用前沿。

產品

第一代產品

基因擴增熱循環儀（DNAThermalCycler）+電泳儀+紫外分析儀+定性試劑，構成PCR定性檢測。

第二代產品

基因擴增熱循環儀+螢光儀+終點定量試劑，構成PCR-DNA終點法定量檢測（End-pointquantitativePCRdetection），又分為終點酶免定量（　End-pointELISA-PCR）和終點螢光定量（End-pointFluor-PCR）兩種。

第三代產品

實時定量QPCR儀+實時螢光定量試劑，構成QPCR-DNA/RNA實時螢光定量檢測。

特點

QPCR至少有以下特點：

所用儀器少，只用一台儀器。

檢測時間短，只須45分鐘～1小時10分鐘（試劑各異），而定性PCR須3～4小時，酶免終點定量須6～8小時，螢光終點定量須2～3小時。

操作極其簡單：前處理後，樣本插入儀器一小時後到電腦上來出報告即可，無須開蓋，移樣本（以前方法），避免污染。

結果精確：定性PCR只能定性，很粗略，終點定量PCR由於只能在40個熱循環結束後檢測螢光，被測螢光達到飽和導致定量不夠精確，屬於半定量狀態。而實時螢光QPCR是在擴增的每時每刻連續檢測各樣本的螢光值的變化，如圖一所示：

圖一西安天隆TL988實際曲線1

檢測動態範圍：10～10000000000DNAcopies/ml

檢測精度：0.1RLU

辨別率：5000和10,000個模板拷貝樣本的辨別率99.7%。

現狀

實時螢光QPCR是當今世界用於臨床的最先進核酸分子診斷技術，被美國FDA承認並推崇，被美國FDA批准並取得臨床套用執照的QPCR試劑品種有：

B肝病毒（HBV），C肝病毒（HCV），愛滋病病毒（HIV），沙眼衣原體Chlamyditrachomatis（CT），性傳播疾病，淋病雙球菌Neiserriagonorrhea(NG)，巨細胞病毒Cytomegalovirus（CMV），呼吸道疾病，結核分支桿菌Mybobacteriumtuberculosis（Mtb）等。