結核菌素

結核菌素試劑有兩種,一種為舊結核菌素(old tuberculin OT),為含結核分枝桿菌的甘油肉湯培養物加熱過濾液,主要成分是結合蛋白,也含有結核分枝桿菌生長過程中的其他代謝產物和培養基成分。另一種是純蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)是OT經三氯醋酸沉澱後的純化物。

本品系用1~2株牛型或禽型結核菌株,接種適宜培養基培養,收穫培養物,經滅活、濾過除菌、提純或濃縮製成。用於診斷動物結核病。

【性狀】凍乾提純結核菌素為乳白色或略帶淡黃色疏鬆團塊,加稀釋液後迅速溶解。液體提純結核菌素為無色或略帶黃褐色澄明液體。

【作用與用途】用於診斷動物結核病的變態反應試驗。

(l)診斷牛結核,用牛型提純結核菌素。凍乾製品應先用注射用水(或生理鹽水)稀釋成每毫升含10萬國際單位後使用,不論牛隻大小,均於頸中部上1/3處剪毛(或提前l日剃毛),用酒精棉消毒後,皮內注射0.1lmL。3月齡以內的犢牛,可在肩胛部做試驗。注射前用卡尺測量術部中央皮皺厚度,作好記錄。注射後72h判定,觀察局部有無熱痛腫脹等炎性反應,並用卡尺測量術部皮皺厚度,作好詳細記錄。如有可能,對陰性和可疑牛,於注射後96和120h再分別觀察1次,以防個別牛出現較晚的遲髮型變態反應。

判定標準:

陽性反應局部有明顯的炎性反應,皮厚差等於或大於4mm。

可疑反應局部炎性反應較輕,皮厚差在2.1~3.9mm間。

陰性反應無炎性反應,皮厚差在2mm以下。

只要有一定炎性腫脹,即使皮厚差在2mm以下者,仍應判為可疑。

凡判為可疑反應的牛,立刻在另一頸側以同一批菌素同一劑量進行第2次注射,再經72h觀察反應。

(2)診斷雞結核,用禽型提純結核菌素。凍乾製品應先用注射用水或生理鹽水稀釋成每毫升含25000國際單位後使用,液體製品則直接使用。肉髯皮內注射0.lmL,經24h判定。雞的肉髯增厚、下垂,發熱呈瀰漫性水腫者為陽性反應;腫脹不明顯者為疑似反應;無變化者為陰性反應。

(3)診斷豬結核,同時用牛、禽兩種提純結核菌素。一側耳根外側皮內注射牛型結核菌素0.1mL(10000國際單位),另一側耳根外側皮內注射禽型結核菌素0.1mL(2500國際單位),注射後72h判定,判定標準與牛相同。

(4)診斷馬、綿羊和山羊的結核,同時用牛禽兩種菌素的1:4稀釋液,分別皮內注射0.1mL。馬的注射部位與牛相同。

禽型提純結核菌素也可作為診斷牛羊副結核的變應原,套用其原液(25000國際單位/

mL)皮內注射0.1mL,注射部位和判定標準與診斷牛羊結核相同。羊也可試用尾根和頸部皮內注射。

(5)牛、禽兩型提純結核菌素的對比診斷適用於結核檢疫中遇到的可疑牛和弱陽性牛,或牛群有感染禽結核菌或副結核菌等的可疑症候時。方法和判定:於頸中部上1/3處按常規

剪毛、測量原皮厚,消毒後皮內注射禽型提純結核菌素(25000國際單位/mL)0.1mL,在同側頸中部下1/3處(距離上述注射點不少於l0cm)同上法皮內注射牛型提純結核菌素(100000國際單位/mL)0.lmL,注射後72h判定(如有可能,分別於48、72和96h各觀察l次)。詳細觀察和比較兩種菌素炎性反應的程度,並用卡尺測量其皮厚,計算出皮厚差。(如果增加48和96h的判定時間,即可比較出兩種菌素炎性反應消失的快慢。)判定:如果禽型結核菌素的反應大於牛型結核菌素,兩種菌素之間的皮厚差在2mm以上,且禽結核菌素的反應消失也較慢,這可能是感染了禽結核菌或副結核菌等引起的反應。如兩種菌素炎性反應相近似,皮厚差在2mm以下,則需根據被檢牛群是否已定性為結核牛群或副結核牛群,如已定性為結核牛群,則判為結核牛,如已定性為副結核牛群,則判為副結核牛,必要時隔3月齡後重檢,如仍為可疑,則酌情處理。

【貯藏】在2~8℃,凍乾提純結核菌素有效期為10年;液體提純結核菌素為2年。

【規格】牛型結核菌素(l)2mL/瓶(2)5mL/瓶(3)l0mL/瓶

禽型結核菌素(1)lmL/瓶(2)2mL/瓶(3)5mL/瓶

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