伊紅美藍培養基

伊紅美藍培養基

伊紅美藍培養基是一種化學物質,貯存於冷暗處備用,一般用於檢測大腸桿菌。伊紅為酸性染料,美藍為鹼性染料。伊紅美藍瓊脂培養基在藥典中又名曙紅亞甲藍瓊脂培養基。

基本信息

原理

伊紅美藍培養基伊紅美藍培養基
當大腸桿菌分解乳糖產酸時細菌帶正電荷被染成紅色,再與美藍結合形成紫黑色菌落,並帶有綠色金屬光澤。而產氣桿菌則形成呈棕色的大菌落。
在鹼性環境中不分解乳糖產酸的細菌不著色,伊紅和美藍不能結合,故沙門氏菌等為無色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培養基上不生長。
常用的伊紅美藍乳糖培養基,可用來鑑別飲用水和乳製品中是否存在大腸桿菌等細菌。如果有大腸桿菌,因其強烈分解乳糖而產生大量的混合酸,菌體帶H+,故菌落被染成深紫色,從菌落表面的反射光中還可以看到金屬光澤。

鑑定方法

用伊紅美藍培養基鑑定水中大腸桿菌
步驟如下:
①製作伊紅美藍培養基,趁熱注入培養皿中,凝成平板,待用。
②用滅過菌的錐形瓶盛取河水或溝水,按1:10稀釋。
③取0.1毫升稀釋液接種於伊紅美藍培養基上。用平板劃線分離法進行分離。
④將劃線後的培養皿倒置37℃溫箱中培養18~24小時。培養基中會出現大腸桿菌菌落,菌落中心呈暗藍黑色,發金屬光澤。
⑤將菌落接種於斜面培養基上(由營養瓊脂培養基製成)。

配置方法

配方

蛋白腖 10g
乳糖 10g
磷酸氫二鉀 2g
瓊脂 20~30g
蒸餾水 1000ml
2%伊紅水溶液 20ml
0.5 %美藍水溶液 13ml

儲備製備

先將瓊脂加至900ml蒸餾水,加熱溶解,然後加入磷酸氫二鉀及蛋白腖,混勻使之溶解,再以蒸餾水補足至1000ml,調整PH為7.2~7.4。趁熱用脫脂棉或絨布過濾,再加入乳糖,混勻後定量分裝於燒瓶內,置高壓蒸汽滅菌器內以115℃滅菌20min,貯存於冷暗處備用。

製法

將蛋白腖、磷酸鹽和瓊脂溶解於蒸餾水中,校正PH,分裝於燒瓶內,121℃高壓滅菌15min備用。臨用時加入乳糖並加熱溶化瓊脂,冷至50~55℃,加入伊紅和美藍溶液,搖勻,傾注平板。

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