Envision法

Vision Vision Vision

EnVision法 (enhance labeled polymer system ELPS)
EnVision法又稱為ELPS法(enhance labeled polymer system)，抗原—抗體反應結合後，第二抗體上標記有多聚化合物(葡聚糖)酶複合物(EnVision複合物)，與第一抗體結合，進而由酶作用底物進行顯色定位。EnVision複合物是利用一種多聚化合物將HRP或AKP和第二抗體(抗鼠或抗兔IgG)同時標記在一個多聚化合物上，即形成酶—多聚化合物—第二抗體巨大複合物。
每1個分子的複合物中約含?o個分子的HRP和10個分子的第二抗體，複合物中的HRP的絕對數量遠高於其他複合物(如ABC)，本身已具備高度放大作用，因此EnVision法敏感性顯著高於其他方法。複合物中存在多個第二抗體，也增加了該複合物與特異性抗體的結合機會。同時，人體內不存在該多聚化合物，無非特異性干擾，故背景染色淺。此外，染色步驟為兩步，且第二抗體孵育時較短，使該方法更省時而簡便。
EnVision法操作流程如下。
(1)4弘m常規石蠟切片經烤片後，常規二甲苯、乙醇脫蠟至水，PBS洗3minX3次。
(2)預處理組織切片(可用酶消化或AR或不作任何處理，依一抗質量而定)。
(3)PBS洗3rainX3次。
(4)0．3％H202阻斷內源性過氧化物酶15rain，PBS洗3rainX 3次。
(5)適當稀釋特異性一抗，37~C孵育幾，PBS洗3minX3次。
(6)EnVision複合物(即用型)孵育30min，PBS洗3minx3次。
(7)水洗，復染，常規樹膠封片。
(8)結果觀察。