DNS法測還原糖

DNS即二硝基水楊酸法是利用鹼性條件下,二硝基水楊酸(DNS)與還原糖發生氧化還原反應,生成3-氨基-5-硝基水楊酸,該產物在煮沸條件下顯棕紅色,且在一定濃度範圍內顏色深淺與還原糖含量成比例關係的原理,用比色法測定還原糖含量的。

DNS

DNS即二硝基水楊酸法是利用鹼性條件下,二硝基水楊酸(DNS)與還原糖發生氧化還原反應,生成3-氨基-5-硝基水楊酸,該產物在煮沸條件下顯棕紅色,且在一定濃度範圍內顏色深淺與還原糖含量成比例關係的原理,用比色法測定還原糖含量的。因其顯色的深淺只與糖類游離出還原基團的數量有關,而對還原糖的種類沒有選擇性,故DNS方法適合用在多糖(如纖維素、半纖維素和澱粉等)水解產生的多種還原糖體系中。

試劑製備

將6.3克3,5-二硝基水楊酸和262ml 2mol/L氫氧化鈉,加到500ml含有182克酒石酸鉀鈉的熱水溶液中,再加上5克重苯酚和5克亞硫酸鈉,攪拌溶解,冷卻後加水定容到1000ml,即製成DNS試劑,貯於棕色瓶中放置一周后備用。

標準曲線

分別取葡萄糖標準液(1mg/ml)0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml於15 ml試管中,用蒸餾水補足至1.0ml, 分別準確加入DNS試劑2ml,沸水浴加熱2min,流水冷卻,用水補足到15ml刻度。在520nm 波長下測定吸光度。

樣品測定

樣品液適當稀釋,使糖濃度為0.1-1.0mg/ml,取稀釋後的糖液1.0ml於15ml刻度試管中,加DNS試劑2.0ml,沸水煮沸2min,冷卻後用水補足到15ml刻度,在520nm波長下測定吸光度。從標準曲線查出葡萄糖mg/ml數。求出樣品中糖含量。

相關詞條

熱門詞條

聯絡我們