比濁計數

因此,可用一系列已知菌數的菌懸液測定光密度,作出光密度—菌數標準曲線。 比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。 因此,對於不同微生物的菌懸液進行光電比濁計數應採用相同的菌株和培養條件製作標準曲線。

一、基本原理

當光線通過微生物菌懸液時,由於菌體的散射及吸收作用使光線的透過量降低。在一定的範圍內,微生物細胞濃度與透光度成反比,與光密度成正比,而光密度或透光度可以由光電池精確測出。因此,可用一系列已知菌數的菌懸液測定光密度,作出光密度—菌數標準曲線。然後,以樣品液所測得的光密度,從標準曲線中查出對應的菌數。製作標準曲線時,菌體計數可採用血細胞計數板計數,平板菌落計數或細胞乾重測定等方法。本實驗採用血細胞計數板計數。

二、比濁法

比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定範圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。
此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。

三、特點

光電比濁計數法的優點是簡便、迅速,可以連續測定,適合於自動控制。但是,由於光密度或透光度除了受菌體濃度影響之外,還受細胞大小、形態、培養液成分以及所採用的光波長等因素的影響。因此,對於不同微生物的菌懸液進行光電比濁計數應採用相同的菌株和培養條件製作標準曲線。光波的選擇通常在400~700nm之間,具體到某種微生物採用多少還需要經過最大吸收波長以及穩定性試驗來確定。

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