一、ACTL技術原理
是將無致病性的腺相關病毒（Adeno-associated virus）通過基因重組技術改建為攜帶特定腫瘤相關抗原決定簇基因的重組腺相關病毒（Recombinantadeno-associated virus）,感染患者外周血單核細胞，經細胞因子誘導，單核細胞轉化為具有強大抗原提呈功能的樹突狀細胞（Denriticcells,DC）。獲得的DC可刺激產生有效殺傷腫瘤細胞的細胞毒素T淋巴細胞（CytotoxicT lymphocytes, CTL），所產生的CTL具有腫瘤抗原特異性，即靶向性。經RAAV感染的DC刺激產生的CTL僅針對某種或數種腫瘤相關抗原陽性的腫瘤細胞具有殺傷作用，對抗原陰性的細胞無作用。
ACTL靶向性抗腫瘤免疫技術原理圖二、ACTL技術優勢
靶向性：靶向性殺滅腫瘤細胞，對正常機體無影響，殺傷效率更高；
高效性：體外培養產生的CTL具有強大的靶向殺傷作用，療效確切，治療腫瘤譜廣；
安全性：安全可靠，無毒副作用；
逆轉耐藥性：可逆轉小分子靶向藥的耐藥性；
方便性:臨床治療周期短，一次治療為(12-14天)。
預防治療作用：治療一些癌前病變從而發揮預防治療作用。
三、ACTL治療流程
1. 體檢：提交相關體檢報告至主治醫生處進行評估，符合治療標準者，簽署患者知情同意書；
2. 篩選：進行免疫組化檢測，對腫瘤抗原進行篩選；
3. 採血：抽取患者外周血80-150ml，分離出外周血單核細胞（PBMC）；
4. 細胞培養：實驗室誘導培養12-18天。經培養，PBMC被分離為淋巴細胞和單核細胞，rAAV感染單核細胞，並以細胞因子誘導DC產生，將成熟的DC與淋巴細胞混合培養，是淋巴細胞誘導成為具有抗原特意性的，殺傷抗原陽性腫瘤細胞的CTL；
5. 回輸：一般在採血後的14天左右進行回輸，將激活的CTL採取靜脈注射回輸給患者，30分鐘內完成。
四、ACTL臨床適應症
ACTL 免疫治療的適應症非常廣泛。腫瘤患者符合以下條件，便可接受治療：
· 腫瘤組織MHC-I類分子（HLA-I類抗原）陽性；
· 至少一種腫瘤相關抗原陽性；
· 肝腎功能正常；
· 無嚴重貧血；
· 停止化學治療和放射治療，外周血細胞數無偏低；
· 較大的腫瘤組織已經切除；
· 無嚴重過敏症。
五、ACTL技術無毒副作用
經臨床試驗表明，本專利治療技術無明顯毒副作用。可能發生的反應：
· 流感樣症狀：主要發生在一部分患者回輸後的數小時內。一般情況下，無需給藥治療，數小時後症狀可自動消失。主要表現症狀為：發熱(37℃-39℃)和肌肉酸痛。若患者不能耐受，可給予一般退熱藥物即可。
· 興奮：主要發生於回輸後的數天內。患者感覺良好，體力增加。
· 疲勞：主要發生在晚期患者，尤其有化療，放療史或存在貧血的患者。採取支持療法，可緩解此症狀。
六、ACTL技術研發介紹
目前在臨床上廣泛套用的是第一代ACTL技術，其技術原理及技術優勢在本研究報告中已有詳細的論述，本公司在其基礎上已研發成功第二代、第三代、第四代和第五代ACTL技術，其特點如下所述：
第二代ACTL技術
深圳益世康寧生物科技有限公司為提高ACTL製備的效率，在第一代ACTL技術的基礎上，推出第二代ACTL技術。第二代ACTL技術除具有第一代ACTL技術的所有優點外，其主要特徵是快速高效的分離單核細胞和淋巴細胞，不僅收穫的DC數量較第一代ACTL技術增加6-8倍，而且純度更高，相應地增加了具有殺傷作用的CTL數量，CTL純度更高，更有利於促進ACTL療效的提高。與第一代ACTL技術相比較，其優點在於：
1.DC製備流程大為簡化。操作時間縮短，工作效率增加以及勞動強度降低；
2.分離單核細胞和淋巴細胞的效率明顯提高，過程簡單，其收穫的DC和淋巴細胞的數量和純度更高，DC的抗原遞呈能力更強；
3.CTL製劑的純度明顯增加，明顯提高具有殺傷作用的CTL數量，其抗腫瘤的靶向性更強，能更有效的殺滅腫瘤細胞。
簡而言之，第二代ACTL的特點是：DC和CTL的數量增加，更加高效和簡化，靶向性更強。
第三代ACTL技術
深圳益世康寧生物科技有限公司 研發人員在第二代ACTL的基礎上研發成功第三代ACTL技術。第三代ACTL技術除了具有第一和第二代ACTL技術的所有優點外，其主要特點是提高DC和CTL細胞的功能，並產生一定數量的記憶性T淋巴細胞。與第一、二代ACTL技術相比較，其優點在於：
1.製備流程更加簡化，提高製備效率；
2.DC的抗原遞呈能力和共刺激能力以及CTL的殺傷活性明顯提高；
3.產生一定量的記憶性T淋巴細胞，提高對腫瘤轉移和復發的療效。
第四代ACTL技術
在ACTL技術的基礎上研發出的第四代ACTL技術，除了具有一、二、三代ACTL技術的所有優點外，其優點在於：
1.rAAV在感染單核細胞後能在數小時內快速表達腫瘤相關抗原蛋白，並達到表達高峰，區別於普通載體需要72小時後才能達到表達高峰；
2.提高腫瘤相關抗原的表達量，更好地刺激DC分化和成熟；
3.有利於縮短DC表達抗原、加工抗原和培養的時間。
第五代ACTL技術
深圳益世康寧生物科技有限公司研發人員在研發出第四代ACTL技術的同時，研發出第五代ACTL技術。第五代ACTL技術除了具有以往各代ACTL技術的所有優點外，其優點在於：
1.rAAV能夠定向感染單核細胞，而對其他細胞無作用，進而更好的保障rAAV的安全性；
2.定向感染有利於提高rAAV的感染率。
七、ACTL技術產品目錄
1. AAV/CEA(癌胚抗原)
2. AAV/Her-2/neu(Her-2/neu抗原)
3. AAV/CK19(細胞角質蛋白19)
4. AAV/MAGE-A3(一種黑色素瘤抗原)
5. AAV/PSMA(前列腺特異性膜抗原)
6. AAV/BA46(乳汁蛋白抗原)
7. AAV/Bcg1(乳腺癌相關抗原-I)
8. AAV/AFP(甲胎蛋白)
9. AAV/HPVE6-E7(人乳頭瘤病毒E6和E7抗原)
10. AAV/LMP-1(EB病毒LMP-1抗原)
11. AAV/PSA(前列腺特異性抗原)
12. AAV/PAP(前列腺酸性磷酸酶抗原)
13. AAV/HM1.24(多發性骨髓瘤抗原)
14. AAV/SPANX(一種腫瘤-睪丸抗原SPANX)
15. AAV/SP17(精子蛋白17抗原)
16. AAV/SCC(鱗狀上皮細胞癌抗原)
17. AAV/Survivin(生長素抗原)
18. AAV/MUC-1（黏蛋白抗原）
19. AAV/G250（碳酸酐酶抗原）
20. AAV/CT10（腫瘤-睪丸抗原10）
21. AAV/CD20
22. AAV/CD269
預計五年內，將完成數十種攜帶腫瘤抗原或腫瘤相關抗原的rAAV，使產品總數上升為50餘種。
八、ACTL技術專利
美國專利4項，歐洲專利1項，中國專利8項。五年內可以20餘項國際、國內新專利。目前有5項新專利已受理。
