脫氧核糖核苷三磷酸

申請專利號CN00100844.7 
專利申請日2000.02.17 
名稱脫氧核糖核苷三磷酸的製備方法
公開(公告)號CN1269422
公開(公告)日2000.10.11 
類別化學;冶金
頒證日 
優先權
申請(專利權)郭煥芳 
地址102413北京市275信箱92分箱 
發明(設計)人郭煥芳 
國際申請
國際公布
進入國家日期 
專利代理機構北京市科技專利事務所 
代理人杜澄心 
摘要
本發明涉及人工合成DNA的必備前體原料的製備方法。本發明採用酶解—酶促—化學合成全新工藝。採用天然DNA經溶液態脫氧核糖核酸酶的酶解可得到DNMP,DNMP收率為70—90%。DNMP在經DNMP酶反應一步後結合化學反應,可分別轉化為相應的DNTP,經層析法純化,以鈉鹽或鋇鹽的形式沉澱分離,可以得到純度為95%—97%的DNTP。本發明不僅使DNTP的生產工藝變的簡單,而且使生產量達到了摩爾級,適於工業生產,並且污染性極小。 

主權項

權利要求書1.一種脫氧核糖核苷三磷酸的製備方法,包括以下步驟:(1)酶解:DNMP酶製備的培養基的基本組成和含量為5——10%的細菌培養用酵母提取物、0.5—2%的蛋白腖、4—6%的磷酸二氫鉀、2—5%的磷酸氫二鉀、10—15%的葡萄糖、0.5—3%的尿素、0.2%的氯化鈣、0.2%的氯化鋅,餘量為水溶液;以上培養基經滅菌、接種、收集和萃取直接獲得;萃取液不經純化可直接使用;將商品DNA分散在水中製得DNA水溶液,在所述DNA溶液中加入鋅離子使其濃度達到2×10—2—1×10—4M,根據脫氧核糖核酸酶的活性加入其量,酶解在30—55℃下進行;酶解5—15小時;(2)酶促:DNMP水溶液用10M的氫氧化鉀溶液調節PH為4—8,加入磷酸鹽,再加入金屬離子,用ATP作催化劑,根據DNMP酶的活性加入DNMP酶,50—55℃保溫48—96小時;(3)化學合成:酶促反應完成後,加入等量的醇類溶劑,2—5倍量的磷酸或磷酸鹽,20—40倍量的DCC,80—90℃下反應4—8小時;所得混合液為磷酸鹽,DNMP、DNDP、DNTP和多磷化合物;該溶液經過層析分離可得到純淨的DNTP。

相關詞條

參考連結

1、http://www.helixnet.cn/archiver/tid-2721.html
2、http://scitech.people.com.cn/GB/other2137/
3、http://book.sina.com.cn/nzt/spi/gongzuodna/

熱門詞條

聯絡我們