反相分配色譜

反相分配色譜是用高壓泵將具有一定極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑泵入裝有填充劑的色譜柱，經進樣閥注入的樣品被流動相帶入色譜柱內進行分離後依次進入檢測器，由記錄儀、積分儀或數據處理系統記錄色信號或進行數據處理而得到分析結果。

以高壓液體為流動相的液相色譜分析法稱高效液相色譜法（HPLC）。其基本方法是用高壓泵將具有一定極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑泵入裝有填充劑的色譜柱，經進樣閥注入的樣品被流動相帶入色譜柱內進行分離後依次進入檢測器，由記錄儀、積分儀或數據處理系統記錄色信號或進行數據處理而得到分析結果。
由於高效液相色譜法具有分離效能高、選擇性好、靈敏度高、分析速度快、適用範圍廣（樣品不需氣化，只需製成溶液即可）、色譜柱可反覆使用的特點，在《中國藥典》中有50種中成藥的定量分析採用該法，已成為中藥製劑含量測定最常用的分析方法。
高效液相色譜法按固定相不同可分為液-液色譜法和液-固色譜法；按色譜原理不同可分為分配色譜法（液-液色譜）和吸附色譜法（液-固色譜）等。
目前，化學鍵合相色譜套用最為廣泛，它是在液－液色譜法的基礎上發展起來的。將固定液的官能團鍵合在載體上，形成的固定相稱為化學鍵合相，不易流失是其特點，一般認為有分配與吸附兩種功能，常以分配作用為主。C18（ODS）為最常使用的化學鍵合相，為反相吸附色譜
根據固定相與流動相極性的不同，液-液色譜法又可分為正相色譜法和反相色譜法，當流動相的極性小於固定相的極性時稱正相色譜法，主要用於極性物質的分離分析；當流動相的極性大於固定相的極性時稱反相色譜法，主要用於非極性物質或中等極性物質的分離分析。
在中藥製劑分析中，大多採用反相鍵合相色譜法。